筒箭毒对神经-肌接的影响.docx

实验题目：筒箭毒对神经—肌接头处的兴奋传递的影响实验的基本原理和目的： 当神经纤维传来的动作电位到达神经末梢时，接头前膜首先发生去极化，膜的去极化引起该处膜上存在的电压门控钙通道开放，钙离子内流，钙离子浓度增高，促使突触小泡向接头前膜内侧移动，经出胞过程释放ACh至接头间隙，与终板膜上的N2型受体结合，引起膜通透性改变,离子通道开放，使终板膜发生去极化，产生终板电位，触发收缩偶联，引起肌肉收缩。其后 ACh 极迅速被突触间隙的胆碱脂酶水解灭活。筒箭毒属于非去极化肌松药，又称竞争型肌松药(competitive muscular relaxants)，右旋体具药理活性。此类药物与运动神经终板膜上的N2胆碱受体结合，能竞争性地阻断ACh的除极化作用，不引起膜通透性改变，致使离子通道关闭， 终板膜不能去极化产生动作电位，使骨骼肌松弛。新斯的明抑制胆碱酯酶，使神经未梢释放的ACh 不被破坏。ACh 浓度升高而竞争性地对抗筒箭毒碱的肌松作用。本实验的目的是：通过观察神经电、肌电与肌肉收缩，了解筒箭毒碱的对于骨骼肌神经—肌肉接头处兴奋传递的影响，并分析其作用机制实验材料与试剂：蛙、0.01％筒箭毒碱(任氏液配制)、0.05％新斯的明(任氏液配制)、任氏液 、细线实验的仪器与设备：蛙类手术器械一套、保护刺激电极 2 支、开放刺激电极 2 支、双向电路开关、电子刺激器、 隔离器、张力换能器、计算机实时记录分析系统实验方法：一、 制作坐骨神经腓肠肌标本，将制作的标本与任氏液中浸泡 5-10 分钟。二、将制作的坐骨神经腓肠肌标本安装刺激电极和记录电极，并与张力换能器计算机实时记录分析系统相连。 用改变双向开关的方向来控制刺激神经或肌肉。 将肌腱上的细线缚于张力换能器，使之与记录系统相连，以记录肌肉的收缩。各仪器接地线。三、 1) 寻找最适刺激强度 进入“刺激强度与反应的关系”实验模块，选择程控模式，设置参数为起始刺激 0.02 伏，每间隔 1 秒，刺激强度增加 0.01 伏。随着刺激强度 增加，肌肉收缩产生的张力不断增大直至最大值，此时如果接着增加刺激强度，肌 肉收缩产生的张力不会继续增大。 肌肉出现最大收缩张力时所对应之最小刺激强度 即为最适刺激强度。 2) 以最适强度刺激坐骨神经，观察并记录神经电位、肌电位及肌肉收缩情况。3) 向坐骨神经腓肠肌持续标本滴加 0.01％筒箭毒碱，当肌电消失时，注意坐骨神经电位的变化。然后改变双向开关方向，用电直接刺激肌肉，观察肌电活动与肌肉的?收缩。4) 停止刺激肌肉，持续刺激坐骨神经。同时缓慢滴加 0.05％新斯的明 0.15ml／ 100g，观察神经电位、肌电位和肌肉活动变化情况。四、再制作两组蛙的坐骨神经肌标本，重复实验，记录实验结果。预期结果：刺激坐骨神经，神经动作电位出现，肌电位出现，肌肉收缩。当滴加筒箭毒后， 刺激坐骨神经，神经动作电位正常，但不出现肌电位，肌肉不收缩。直接刺激肌肉， 肌电位出现，肌肉正常收缩。当滴加新斯的明后，神经动作电位仍正常，肌电位变为正常，肌肉收缩。分析：结果说明箭筒毒对神经—肌接头兴奋有抑制作用。直接刺激肌肉，肌电位出现，肌肉正常收缩，说明肌细胞正常，筒箭毒不是通过损伤肌细胞来抑制肌肉收缩。 滴加新斯的明后，兴奋传递恢复正常，肌肉再次正常收缩，由于新斯的明可抑制胆碱酯酶，使神经末梢释放ACh 不被破坏，ACh 浓度升高。ACh 浓度升高后，肌肉又恢复 收缩，说明是筒箭毒与 ACh 竞争性抑制，结合终板膜上 N2 受体而形成的。 若滴加筒箭毒后未出现预期结果，可能是因为筒箭毒的浓度太低，达不到与ACh竞争的浓度，肌肉仍正常兴奋，肌肉收缩。2.蛙类的一些基本生理活动规律与温血动物相似，而维持其离体组织正常活动所需的理化条件比较简单，易于建立和控制。因此在实验中常用蟾蜍或蛙的坐骨神经腓肠肌标本来观察兴奋。3. 制备神经肌肉标本过程中，要不断滴加任氏液，以防止标本干燥，丧失正常生理活性。 4. 滴加筒箭毒碱和新斯的明溶液过程中避免两刺激电极接触，发生短路。5. 操作过程中应避免强力牵拉和手捏神经或夹伤神经肌肉。 6. 分离神经时注意手和金属器械不要碰到神经。7 筒箭毒碱和新斯的明溶液要以任氏液为溶剂。参考文献：1. 人民卫生出版社，生理学（第2版），北京，2012年12月，57 页2. 郑州大学生理教研室，《生理实验指导》，2010 年十二月3. /医学全在线??/pharm/Index.shtml药学理论??/pharm/xuzhi/临床用药须知??/pharm/xuzhi/mazui/麻醉药及其辅助药物??正文:筒箭毒碱的副作用/药理作用/适应症/禁忌症/用法用量 3