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茶叶籽粕中蛋白质的提取与纯化研究
茶叶籽粕中蛋白质的提取与纯化研究
实验仪器:离心沉淀机、电热恒温水浴锅、电子天平、热风干燥器、磁力搅拌器、酸度计、凯氏定氮仪
实验原料:茶籽粕
实验试剂:氢氧化钠、盐酸
实验流程:
蛋白质提取率的计算公式
蛋白质提取率=(上清液中蛋白质含量/样品中蛋白质含量)*100%
实验内容:
1.原材料中蛋白质含量测定:凯氏定氮
2.茶叶籽粕蛋白质等电点的测定:蛋白质等电点的测定采用溶解性法。
准确称取茶叶籽粕20g,加200ml水浸泡,用10%NaOH调节pH值至9,搅拌,3000r/min离心20min,沉渣再加200ml水调节pH值至11,搅拌,离心,合并两次离心的上清液。分取上清液20ml,用15%盐酸调节pH值为3.2、3.4、3.6、3.8、4.0、4.2、4.4、4.6、4.8、5.0的序列,2000r/min离心沉淀20min,将上清液定容至50ml,采用双缩尿法测出各上清液的蛋白质浓度。以PH值为横坐(X)标,浓度(mo1/L)为纵坐标(Y),绘出浓度一pH值的关系图
3. 茶叶籽粕蛋白质分离提取的单因素试验
①茶叶籽粕粒度对蛋白质提取率的影响
序号 粒度目 料液比 pH值 温度(℃) 时间(min) 提取率 1 40 1:10 9 40 30
2 60 1:10 9 40 30
3 80 1:10 9 40 30
4 100 1:10 9 40 30
5 120 1:10 9 40 30 ②料液比(W/V)对茶叶籽粕蛋白质提取率的影响
序号 粒度目 料液比 pH值 温度(℃) 时间(min) 提取率 1 80 1:6 9 40 30
2 80 1:8 9 40 30
3 80 1:10 9 40 30
4 80 1:12 9 40 30
5 80 1:14 9 40 30 ③碱提pH值对茶叶籽粕蛋白质提取率的影响
序号 粒度目 料液比 pH值 温度(℃) 时间(min) 提取率 1 80 1:10 7 40 30
2 80 1:10 8 40 30
3 80 1:10 9 40 30
4 80 1:10 10 40 30
5 80 1:10 11 40 30 ④碱提温度对茶叶籽粕蛋白质提取率的影响
序号 粒度目 料液比 pH值 温度(℃) 时间(min) 提取率 1 80 1:10 9 30 30
2 80 1:10 9 40 30
3 80 1:10 9 50 30
4 80 1:10 9 60 30
5 80 1:10 9 70 30 ⑤碱提时间对茶叶籽粕蛋白质提取率的影响
序号 粒度目 料液比 pH值 温度(℃) 时间(min) 提取率 1 80 1:10 9 40 30
2 80 1:10 9 40 60
3 80 1:10 9 40
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