医用化学第8章.pptVIP

第八章 比色分析法 比色分析法的基本原理 比色分析法（colorimetry）是一种基 于比较有色物质溶液的颜色深浅来确 定物质含量的方法 比色分析法具有简单、快速、灵敏度高等特点，广泛应用于微量组分的测定 朗伯－比尔（Lambert--Beer）定律 例1、 例2、 吸收曲线 比色分析法的测定方法和应用 分光光度法 分光光度法是以钨灯或氢灯光作光源，经单色光器分光后，以所需波长的单色光作入射光，通过测定溶液吸光度来求算溶液中被测物质含量的一种分析方法。 可见分光光度法的测定方法 空白溶液（参比溶液） 2. 标准对照法 应用示例----铁的含量测定 例3、 * 光谱名称 波长范围 跃迁类型 　分析方法 X射线 10-1~100nm K和L层电子 X射线光谱法 远紫外光 10~200nm 中层电子 真空紫外光度法 近紫外光 200~400nm 外层电子 紫外光度法 可见光 400~750nm 外层电子 比色及可见光度法 近红外光 0.76~2.5?m 分子振动 近红外光谱法 中红外光 2.5~5.0?m 分子振动 中红外光谱法 远红外光 5.0~1000?m 分子转动和振动 远红外光谱法 微波 0.1~100cm 分子转动 微波光谱法 无线电波 1~1000m 核的自旋 核磁共振光谱法 电磁波谱范围表 自然光的组成及物质的颜色 青（490~500nm） 白光 （580~600nm）黄 蓝（450~480nm） 紫 （400~450nm） 青蓝（480~490nm） （560~580nm） 绿 （600~650nm）橙 （650~760nm）红 光的互补色示意图 当白光通过溶液时，如果溶液对各种波长的光都不吸收，溶液就没有颜色。如果溶液吸收了一部分波长的光，则溶液呈现透过溶液后剩余部分光的颜色（吸收光颜色的补色）。 例如 我们看到KMnO4溶液在白光下呈紫红色，就是因为白光透过溶液时，绿色光大部分被吸收，而其它各色的光都能透过。在透过的光中除紫红色外都能两两互补成白色，所以KMnO4溶液呈紫红色。 当一束平行单色光照射有色溶液时，光的一部分被吸收，一部分透过溶液。设入射光的强度为I0，溶液的浓度为c，液层的厚度为b，透射光强度为I，则： I/I0-------透光率T lgI0/I-----吸光度A I0=Ia+Ir+I I0=Ia+I 反射光强度 A=k1b —朗伯定律 A=k2c —比尔定律 A=kbc 它表明：当一束单色光通过含有吸光 物质的溶液后，溶液的吸光度与吸光 物质浓度及吸收层厚度成正比。 K-------吸光系数， 与吸光物质的种类和入射光的波长有关。 c以g·L-1为单位时的吸光系数称为质量吸光系数a c以mol·L-1为单位时的吸光系数称为摩尔吸光系数ε 吸光系数越大，表示溶液对入射光越容易吸收。 某待测液用1.0cm吸收池测量时，其透射光强度为入射光强度的1/2，在同样波长下，若用2.0cm吸收池测量该溶液，其透光率和吸光度各为多少？ 解： 已知在525nm处KMnO4溶液的ε＝2235L·mol-1·cm-1，若用2cm比色皿，为使所测得的透光率介于20%－65%之间，溶液的浓度范围是多少？ 若T＝20% 若T＝65% c = 4.19×10-5(mol·L-1) 溶液的浓度范围是1.56×10-4 ~ 4.19×10-5mol·L-1。 解： KMnO4溶液的吸收光谱曲线 A~λ曲线 不同浓度同种溶液，吸收曲线相似，最大吸收波长（光吸收程度最大处的波长）λmax相同。 定量测定时一般选择波长λmax的单色光作为入射光。 若所测溶液无色，可加显色剂显色再测。 目视比色法 用视力比较样品溶液与标准品溶液的颜色深浅以确定物质含量。 A标＝A样 c标L标＝c样L样 当L标＝L样时，c标＝c样 标准系列法: 光源 可见区：钨灯（360~1000nm ） 紫外区：氢灯（200～400nm） 单色器（控制入射光波长） 棱镜或光栅、准直镜、狭缝等组成。 吸收池或比色皿（盛放待测溶液）。 材质：光学玻璃（可见