分子生物学--第一章-绪论.pptVIP

Outline format Outline format Outline format Outline format Outline format Outline format Outline format * 1.1.4. 基因诊断与基因治疗是基因工程在医学领域发展的一个重要方面 1991年美国向一患先天性免疫缺陷病（遗传性腺苷脱氨酶ADA基因缺陷）的女孩体内导入重组的ADA基因，获得成功。 我国也在1994年用导入人凝血因子Ⅸ基因的方法成功治疗了乙型血友病的患者。 在我国用作基因诊断的试剂盒已有近百种之多。基因诊断和基因治疗正在发展之中。 基因工程的迅速进步得益于许多分子生物学新技术的不断涌现。包括：核酸的化学合成从手工发展到全自动合成。 1975-1977年Sanger、Maxam和Gilbert先后发明了三种DNA序列的快速测定法； 90年代全自动核酸序列测定仪的问世； 1985年Cetus公司Mullis等发明的聚合酶链式反应（PCR）的特定核酸序列扩增技术，更以其高灵敏度和特异性被广泛应用，对分子生物学的发展起到了重大的推动作用。 (2) 基因组研究的发展 目前分子生物学已经从研究单个基因发展到研究生物基因组的结构与功能。 1977年Sanger测定了ΦX174-DNA全部5375个核苷酸的序列； 1978年Fiers等测出SV-40DNA全部5224bp序列； 80年代λ噬菌体DNA全部48,502bp的序列全部测出； 一些小的病毒包括乙型肝炎病毒、艾滋病毒等基因组的全序列也陆续被测定； 1996年底许多科学家共同努力测出了大肠杆菌基因组DNA的全序列长4x106bp。测定一个生物基因组核酸的全序列无疑对理解这一生物的生命信息及其功能有极大的意义。 1990年人类基因组计划（Human Genome Project）开始实施，这是生命科学领域有史以来全球性最庞大的研究计划，现人基因组全部DNA 3x109bp的序列基本上已被测定，初步确定人类约3-4万个基因，这将使人类能够更好掌握自己的命运。（1986年由Dulbecco提出人类基因组计划蓝图） 基因信息的识别和鉴定 要获得基因组功能信息，识别和鉴定基因序列是必不可少的基础工作。基因识别需采用生物信息学、计算机技术和生物学实验手段，并将理论方法和实验结合起来。 基于理论的方法主要从已经掌握的大量核酸序列数据入手，发展序列比较、基因组比较及基因预测理论方法。 功能基因组学 (functional genomics) 基因信息的识别和鉴定 识别基因的生物学手段主要有：根据可表达序列标签(STS)；对染色体特异性cosmid进行直接的cDNA选择；根据CG岛；差异显示；外显子捕获；基因芯片技术；基因组扫描；突变检测体系，等等。 由于DNA序列中存在着大量的插入片段、内含子等非翻译区域，筛选有意义基因（功能基因）仍然是一项艰苦的工作。 功能基因组学 (functional genomics) 基因组表达及调控的研究 在全细胞的水平，识别所有基因组表达产物mRNA和蛋白质，以及两者的相互作用，阐明基因组表达在发育过程和不同环境压力下的时、空的整体调控网络。 由于在翻译过程中存在着不同剪切体，同一基因的表达产物可能存在着不同的活性与功能。真正认识基因组中每个基因的具体功能，才能为勾画整个生命蓝图、充分利用基因资源打下基础。 基因功能信息的提取和鉴定 包括：人类基因突变体的系统鉴定；基因表达谱的绘制；“基因改变-功能改变”的鉴定；蛋白质水平、修饰状态和相互作用的检测。 测序和基因多样性分析 人类基因组计划得到的基因组序列虽然具有代表性，但是每个人的基因组并非完全一样，基因组序列存在着差异。基因组的差异反映在表型上就形成个体的差异，如黑人与白人的差异，高个与矮个的差异，健康人与遗传病人的差异，等等。出现最多基因多态性就是单核苷酸多态性(SNPs)。 比较基因组学 将人类基因组与模式生物基因组进行比较，这一方面有助于根据同源性方法分析人类基因的功能，另一方面有助于发现人类和其他生物的本质差异，探索遗传语言的奥秘 是指在基因工程的基础上，结合蛋白质晶体学、计算机辅助设计和蛋白质化学等多学科的基础知识，通过对基因的人工定向改造等手段，从而达到对蛋白质进行修饰、改造、拼接以产生能满足人类需要的新型蛋白质。 又称为第二代基因工程。 蛋白质工程 (prtein engineering ) 生物芯片是指采用光导原位合成或微量点样等方法，将大量生物大