----2.2.2动物细胞工程.pptVIP

1、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？ 3、你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 体细胞核移植技术存在的问题 胚胎移植－动物幼体产出 概率＜10％ 克隆动物存在着健康问题 克隆动物的食品安全性问题存在争议 三、动物细胞融合 三、动物细胞融合 1、动物融合的过程 请同学们阅读课本P52动物融合 思考题 1、植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？ 三、动物细胞融合 四、单克隆抗体 3、制备单克隆抗体利用的原理 利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 P44思考讨论：在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 相应的抗原蛋白 刺激 B淋巴细胞（小鼠） 细胞分化 浆细胞（提取后） 骨髓瘤细胞 动物细胞融合 浆-浆 瘤-瘤 杂交瘤细胞 选择培养基筛选 杂交瘤细胞 抗原-抗体杂交筛选 可产生目标抗体杂交瘤细胞 体外培养液培养 注入小鼠腹腔内培养 杂交瘤细胞大量繁殖 产生 单克隆抗体 （只有部分可产生抗体） 2.制备过程 （免疫原理） （细胞融合原理） （动物细胞培养原理） 4、单克隆（clone）抗体的概念 抗体－－ 化学性质单一、特异性强 单－－－单个浆细胞 克隆－－ （细胞的增殖） 总结： 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、 特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特异性强，灵敏度高，可大量制备。 应用主要有： 1、临床诊断：准确、高效、简易、快速 2、治疗疾病（主要是癌症）和运载药物 5、单克隆抗体的应用 （生物导弹=单克隆抗体+药物) 优点：位置准确、疗效高、副作用小 优点： . . 小结 两个过程 动物细胞融合过程 单克隆抗体制备过程 三个“一” 一个诱导细胞融合的新方法 －－灭活病毒 一个新细胞－－杂交瘤细胞 一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案 2、该方案能达到预期效果吗？为什么？ 4、图中B为________过程，常用_________作为诱导剂，该细胞继承___________的遗传特性，既能__________,又能___________。 1、该实验方案的目的是__________ 3、A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______ 5、C过程指细胞培养，该过程包括_____培养和_____培养两个阶段，其中_____代以内的的细胞属于细胞株。 制备单克隆抗体 B细胞 抗体 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞 分泌抗体 无限增殖 原代 传代 50 B 体外培养 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 足够数量的细胞群 注射到 小鼠腹腔 A C * * 动物细胞工程 四、单克隆抗体 三、动物细胞融合 一、动物细胞培养 二、核移植技术 离体植物器官、组织或细胞 愈伤组织 胚状体 植物体 脱分化 再分化 （芽、根） 复习植物组织培养技术 一、动物细胞培养 动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖. 动物细胞培养 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 剪碎组织 胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 制成细胞悬液 转入培养液 传代培养 细胞的接触抑制 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 处理制成细胞悬液 原代培养 动物的组织、器官 剪碎 胰蛋白酶 细胞悬液 +培养液 原代培养 胰蛋白酶 10代 （细胞接触抑制） 10-50代 细胞悬液 传代培养 核型改变 无限传代 获得不死性 传代培养 注：即癌变，无接触抑制 动物细胞培养的条件： 培养液和所有培养用具进行无菌处理 措施：培养液中加抗生素，定期更换培养液 糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子 （维生素、激素等）和动物血清 36.5±0.5℃ 7.2-7.4 O2 CO2 95％空气+5％的CO2 无菌、无毒的环境 营养 温度和PH 气体环境 思考： 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ 1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组织培养基有何独特之处？ 3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养