预处理纤维素实验设计.docVIP

碱预处理酶解纤维素实验设计 实验目的 研究碱预处理对纤维素酶解的效果，研究出一种高效产糖且实用的处理配方，得出最佳碱处理浓度、最佳反应时间、最佳实验温度等实验参数。 实验仪器及试剂 实验仪器： 具塞三角瓶，天平，摇床，恒温箱，粉碎机，UV一1100型紫外分光光度计，超声波发生器（微波实验装置采用上海新仪微波化学科技有限公司制造的MAS．1I型常压微波合成／萃取反应工作站，其微波功率随设定温度自动变频控制，非脉冲微波连续加热，使反应物料在设定的反应条件下得到最大限度的微波作用，微波最大功率设十档(300 W一1000 W)，每档在最大功率以内随反应温度自动调节．） 实验试剂：NaOH，蒸馏水，?纤维素酶秸秆的主要成份为纤维素、半纤维素和木质纤维素，但由于纤维素不仅被半纤维素和木质素所包裹，且其本身也存在着高度结晶性，使酶制剂很难与纤维素接触。因此天然纤维素材料直接进行酶促水解，酶解率一般都非常低(25％)，进而影响了总糖产率。 NaOH不改变主体纤维素的化学结构，但可以打开纤维素和半纤维素与木质素之间对碱不稳定的酯键，从而使纤维膨胀，溶解部分果胶、木质素和半纤维素等低分子杂质，进而提高秸秆的酶解率。 实验步骤 1.机械粉碎 用粉碎机将秸秆粉碎为渣状。 2.碱的预处理 用一定浓度（资料显示0.5%-3.0%或8%-12%）的NaOH溶液在设定温度（资料显示60℃-80℃）下浸泡第一步处理后的秸秆，固液比为变量，暂定为1:10。 实验计划 1.在恒温状态下，探究NaOH预处理的最适浓度和最适反应时间，以及酶解反应得最佳时间 2.对比不同温度下的酶解率，得出最适反应温度 3.改变固液比，得出最适固液比 实验记录表格 实验设定温度: ℃ 固液比: g/ml 1% 2% 3% 0.5h 1h 1.5h 2h 实验设定温度: ℃ 固液比: g/ml 8% 10% 12% 0.5h 1h 1.5h 2h 2h 实验管理 前期每组实验人员12h取一次样检测酶解反应的水解率，待确定最适酶解反应时间后，按规定时间取样检测即可。 预处理实验时，每批处理后开始酶解反应前应贴上标签，写明NaOH预处理的时间，浓度和温度。 微波辐射催化纤维素水解设计 （酸碱处理后的溶液均用微波处理） 取0．5g干燥的处理后纤维素装入微波专用烧瓶中，加入设定不同的反应温度(或微波功率)和反应时间进行反应。反应后进行抽滤，将未反应的固体(滤饼)真空干燥，称重，仍以DNS法测量还原糖的量。 50℃ 60℃ 70℃ 80℃ 90℃ 100℃ 110℃ 120℃ 30min 40min 50min 60min 70min 80min 90min 酶解实验 处理一定时间后，过滤溶液，取秸秆渣洗涤至中性。将秸秆渣放入容器中，调pH值至酶的较适pH，加入适量纤维素水解酶，在恒温箱中反应），每0.5h取一次样，测定水解液的含糖量，并记录到表格中。 30min 40min 50min 60min 70min 80min 90min 酸预处理酶解纤维素实验设计 稀酸水解工艺采用两步法：第一步稀酸水解在较低的温度下进行，在此过程中，半纤维素非常容易被水解得到木糖等五碳糖产物；第二步稀酸水解是在较高的温度下进行，重新加酸水解残留固体(主要为微晶纤维素)，得到可发酵水解产物葡萄糖。 常用的无机酸为硫酸、盐酸和磷酸等。 实验药品及设备 瓷坩锅、电热炉，烘箱、冷凝器、滤纸、漏斗、量筒、恒温水浴锅、称量瓶、锥形瓶、干燥器等， (2)试验试剂：硫酸、盐酸、氢氧化钠、蒸馏水，DNS试剂（自配）,硫酸亚铁等 实验步骤 （1）将秸秆粉碎后（尺寸0.5mm-1.0mm)称量一定量配成原浆，固液比在1:10到1:20之间，待用。 （2）浸泡几分钟后，待其浸润。再加入10mL一定浓度的含硫酸亚铁的硫酸，混合均匀后放入烘箱中，在一定温度下，水解一段时间。也可用水浴锅代替。 （3）取出2.5ml水解液，按不同因素水平下的实际酸浓度用1mol／L的氢氧化钠溶液中和至中性。 （4）加入2.5ml DNS显色剂，于沸水中水浴5min，各准确吸取1ml，稀释至25ml，于分光光度计530nm处比色，重复三次取平均值作为该样品的吸光值。根据葡萄