生物化学第八章节幻灯片.pptVIP

真核生物多肽链的合成（自学） 1、真核细胞核糖体比原核细胞核糖体更大更复杂； 2、起始氨基酸为Met，不是fMet； 3、肽链合成的起始：由40S核糖体亚基首 先识别mRNA的5’端-帽子，然后沿mRNA移动寻找AUG； 4、起始因子有12种，但只有2种延长因子和1种终止因子； 5、真核细胞种线粒体、叶绿体的核糖体大小、组成及蛋白质合成过程都类似于原核细胞。 第三节 肽链合成后的折叠与加工 从核蛋白体释放出的新生多肽链不具备蛋白质生物活性，必需经过不同的翻译后复杂加工过程才转变为天然构象的功能蛋白。 多肽链的折叠是指从多肽链氨基酸序列形成正确的三维结构的过程。 蛋白质二硫键异构酶（protein disulfide isomerase）和肽基脯氨酸异构酶（peptidyl prolyl isomerase）参与蛋白质的折叠过程。 前者能加速蛋白质正确二硫键的形成。后者则加速脯氨酸亚氨基肽键的顺-反异构化。 1. 多肽链的折叠 多肽链的修饰是指多肽链中氨基酸残基被切除或在氨基酸残基中添加和改变一些基团,从而使多肽链形成具有一定高级结构和生物活性的蛋白质分子的过程。 2. 多肽链的修饰 (1) 末端氨基的去甲酰化和N-甲硫氨酸的切除 原核细胞多肽N-末端的甲酰甲硫氨酸的甲酰基可在去甲酰酶的催化下被除去。 在原核和真核细胞中多肽N-末端的甲硫氨酸均可被氨肽酶除去。 (2) 一些氨基酸残基侧链被修饰 有些氨基酸没有相应的遗传密码，而是在肽链从核糖体释放后经化学修饰形成的。如胶原蛋白中含有大量的羟脯氨酸和羟赖氨酸，分别是脯氨酸和赖氨酸经羟化而成的。有些蛋白质中的天冬酰胺、丝氨酸和苏氨酸发生糖基化形成糖蛋白，丝氨酸磷酸化成为磷酸丝氨酸。 (3) 二硫键的形成 多肽链的半胱氨酸残基可在蛋白质二硫键异构酶的作用下形成二硫键，肽链内或肽链间都可形成二硫键，二硫键在维持蛋白质的空间构象中起了很重要的作用。 (4) 多肽链的水解断裂 许多具有一定功能的蛋白质如酶、激素蛋白，在体内常以无活性的前体肽的形式产生，这些前体在一定情况下经体内蛋白酶的水解切去部分肽段，才能变成有活性的蛋白质，如胰岛素原变成胰岛素，胰蛋白酶原变为胰蛋白酶等。 第四节 蛋白质定位 无论是原核还是真核细胞都是一个高度有序的结构，新生的蛋白质要被准确地运送到细胞的各个部分，如溶酶体、线粒体、叶绿体、细胞质和细胞核等，以更新其结构组成和维持其功能, 这一过程称为蛋白质的定位。 1、分泌蛋白 ● 信号肽假说简图 ● 分泌蛋白质的合成和胞吐作用 2、线粒体与叶绿体蛋白 ● 蛋白质向线粒体的定位机制 信号肽假说简图 3ˊ 5ˊ SRP循环 mRNA 内质网膜 内质网腔 信号肽酶 信号肽 分泌蛋白质的合成和胞吐作用 内质网 高尔基体 泡 泡 泡融入质膜 核糖体 芽泡 线粒体外膜 线粒体内膜 带有导肽的线粒体蛋白质前体跨膜运送过程示意图 内外膜接触位点的蛋白质通道 线粒体hsp70 受体蛋白 hsp70 导肽 蛋白酶切除导肽 2. 核糖体的组成 核糖体 rRNA 蛋白质 原核生物 70S 30S 16S 21种 50S 23S、5S 34种 真核生物 80S 40S 18S 30-32种 60S 28S、5S、5.8S 36-50种 核蛋白体的组成 mRNA结合部位： 大小亚基之间存在一条细沟，用于接纳mRNA；此外，小亚基的16S rRNA可以与mRNA相互作用，从而参与mRNA与核糖体的结合。 ? 3. 核糖体上的活性部位 (1) 结合部位 tRNA结合部位：有2个 氨酰基部位（A位）—— 氨酰tRNA的结合部位； 肽基部位 （P位） —— 正在延长的多肽基tRNA的结合部位； tRNA的这两个结合部位有一小部分在30S亚基内，大部分在50S亚基内。 （1）P位：即肽位(peptidyl site)，或给位，在延长成肽之后，3′端连接肽链的肽酰tRNA占据的位置，肽链转位至此，延长继续。 （2）A位：即氨基酰位(aminoacyl site)，或称受位，每次延长，氨基酰tRNA就加入到A位上，延长成肽中，此位因接受肽酰基链，故名受位。 原核生物翻译过程中核蛋白体结构模式: A位：氨基酰位 (aminoacyl site) P位：肽酰位 (peptidyl site) E位：排出位 (exit site) 催化肽键形成的部位： 称为肽基转移酶，又叫转肽酶。位于大亚基上。 1992年发现该活性是由23S rRNA提供的。? 3. 核糖体上的活性部位 (2) 催化部位 催化GTP水解的部位： 位于大亚基上，