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泡沫 泡沫的存在 阻碍二氧化碳的排除,直接影响到氧的溶解,因而将影响到微生物的生长繁殖和代谢产物的生成。 同时,泡沫层过高,往往造成发酵液随泡沫送出罐外,不但浪费原科,还会引起染菌造成更大损失。 又因泡沫上升,发酵罐的装料量也将受到限制,从而降低了发酵罐的利用率。 因此,必须采取消泡措施。 消泡方法,一种是机械消泡,它又分为罐内和罐外消泡两种,但效果不如化学消泡那么显著;另一种是消泡剂消泡,即化学消泡。 * 消泡剂消泡的机理 消泡剂消泡的机理有两个方面, 一是加入消泡剂后,可降低泡沫表面张力,并使其泡沫破裂。 二是改变其电荷性质,降低泡沫的机械强度。我国酶制剂发酵生产中常用的消泡剂为天然油类、甘油聚醛(聚氧丙烯甘油醚)或泡敌(聚环氧丙烷环氧乙烷甘油醚)。 * 酶制剂发酵过程中,泡沫的消长在正常情况下有一定规律,一般是随着菌体的旺盛生长繁殖和代谢产物——酶的大量积累而泡沫上升。消泡剂的添加应根据泡沫上升程度而定。通常发酵罐内消泡剂的消泡作用不能控制泡沫上升时就应及时添加,消泡剂的添加以勤加、少加效果较好,不宜一次大量添加,如果添加过量,不仅抑制菌体生长和产酶,而且影响酶制剂的提取。 5. 湿度 当用固体发酵法生产酶制剂时,培养基的湿度(即水分)和发酵室空气中的相对湿度对微生物菌体的生长繁殖和产酶关系很大。 湿度高低,视菌种和所产酶的不同而异,即使同一菌种和所产同一种酶,由于菌种生长繁殖和产酶时期的不同,对湿度要求也不一样。 在酶制剂发酵过程中,一般说来,培养前期湿度低些,培养后期湿度大些有利产酶。 * 89 三、发酵过程的中间补料 在酶制剂生产中,采取中间补料工艺对发酵单位的提高起了重要作用。它促使微生物在培养中间的代谢活动受到控制,延长发酵产物的分泌期,推迟菌种的自溶期,维持较高的产酶活力的增长幅度,并增加发酵液的总体积,从而使单罐产量大幅度上升,因而在生产上广泛使用。 中间补料是在发酵过程中补充某些营养物料、水或产酶促进剂,以满足微生物的代谢活动和产酶的需要。虽然发酵产品种类不同,但补料的原则大致相似,一般要根据微生物生长代谢规律,发酵产品的生物合成途径,并结合长期积累的丰富实践经验,来确定补加的方案。 * 90 补料内容大致可分以下几个方面: 补料内容大致可分以下几个方面: 1.补糖 如强加葡萄糖、饴糖、工业糖液或废母液、水解淀粉、玉米粉和废糖蜜等。 2.补氮 如添加玉米浆、尿素、酵母粉、豆饼粉等有机氮源和氨水、硫酸铵等无机氮源。补氮亦可以调节发酵液pH的变化。 3.补无机盐类和产酶促进剂 微量元素或前体物质及产酶促进剂,在发酵过程中补充微生物生长或生物合成所需,如磷酸盐,硫酸锌、硫酸锰、碳酸钙、硫代硫酸钠、维生素类及吐温80等表面活性剂之类。 * 91 4.补全料和补水 可改善通风搅拌效果,提高发酵中的溶解氧,并提高单罐产量。 以α-淀粉酶用3倍浓度碳源的培养基补料,体积相当于基础料的1/2,从培养12小时开始。每小时1次。分30余次添加完毕。延长了发酵时间,提高酶活力和单罐产量。 糖化酶发酵通过中间补料和补水,发酵情况大大改善,使酶活力继续提高。 在曲霉3.942中性蛋白酶生产中,添加了产酶促进剂一一洗净剂LS,使酶活力提高了约50%左右。 * 92 生产工艺 —— 提取 * 发酵液预处理 酶的沉淀或吸附 (盐析法、有机溶剂沉淀法或白土或活性氧化铝吸附) 干 燥 (收集沉淀进行干燥磨粉,加入适当的稳定剂、填充剂等制成酶制剂;或在酶液中直接加入适当的稳定剂、填充剂,直接进行喷雾干燥) 四、酶的提取: 酶制剂产品 * 液体酶 固体酶 生产工艺—造粒 * 酶粒是在大型连续运转的水平混合机内生产出来的。提取的酶与盐、纤维素及其他成分混合形成0.5mm大小的粒状物。然后用一种聚合体包裹,以防止酶尘在使用过程中可能引起的致敏危险。 造粒对顾客及包含酶的最终产品来说,都是一种非常有效和安全的运输固态酶的方式。 用多聚体包裹酶以减少酶尘引起的致敏危险。 生产工艺—生产废渣处理 * 生产废渣实际上是有益于环境的。可被用做当地农田的肥料。 确保所有的微生物均经灭活之后才能从生产车间中运出。将含硅藻土、培养基和微生物的发酵液经加热及用碳酸钙进行处理。处理后的发酵液废渣最终为可持续性工业解决方案做出了贡献。 即使是生产废渣也是有用的;它们可以用作肥料。 将生产废渣用做肥料 * 生产工艺-中性蛋白酶工艺流程 提高酶产量的方法 酶合成的调节机制:在正常情况下,酶
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