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第四节 紫外、可见分光光度法的应用 一、定性分析 二、有机化合物构型和构象的确定 三、定量分析 定性鉴别 纯度检查和杂质限量鉴定 单组分的定量方法 多组分的定量方法 一、定性分析 （一）定性鉴别 定性鉴别的依据→吸收光谱的特征 吸收光谱的形状 吸收峰的数目 吸收峰的位置（波长） 吸收峰的强度 相应的吸光系数 续前 1．对比吸收光谱的一致性 同一测定条件下， 与标准对照物谱图或标准谱图 进行对照比较 续前 2．对比吸收光谱的特征值 续前 3．对比吸光度或吸光系数的比值： 例： 二、有机化合物构型和构象的确定 采用紫外光谱，可以确定一些化合物的构型和构象。一般说来，顺式异构体的最大吸收波长比反式异构体小，因此可以用紫外光谱进行区别。 采用紫外光谱法，还可以测定某些化合物的互变异构现象。例如，乙酰乙酸乙酯有酮式和烯醇式间的互变异构。 紫外光谱也可以用于确定构象。例如ａ-卤代环己酮有两种构象，一个C-X键为直立键、另一个为平伏键。 三、定量分析 （一）单组分的定量方法 1．吸光系数法 2．标准曲线法 3．对照法：外标一点法 续前 1．吸光系数法（绝对法） 练习 例：维生素B12 的水溶液在361nm处的百分吸光系数为207，用1cm比色池测得某维生素B12溶液的吸光度是0.414，求该溶液的浓度。 解： 练习 例：精密称取B12样品25.0mg，用水溶液配成100ml。精密吸取10.00ml，又置100ml容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，于361nm处测定吸光度为0.507，求B12的百分含量？ 解： 练习 例： 解： 续前 2．标准曲线法 示例 芦丁含量测定 0.710mg/25mL 续前 （二）多组分的定量方法 三种情况： 1．两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） 两组分在各自λmax下不重叠→分别按单组分定量 续前 2．两组分吸收光谱部分重叠 λ1→测A1→b组分不干扰→可按单组分定量测Ca λ2→测A2→a组分干扰→不能按单组分定量测Ca 续前 3．两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定 等吸收双波长消去法
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