实验三包合物预习报告.docVIP

实验三、姜黄素β—环糊精包合物的制备及质量检测 一、实验目的与要求 1．掌握饱和水溶液法制备包合物的工艺及操作关键； 2. 掌握包合物的质量检测方法（紫外分光光度法）； 3．了解β-环糊精的性质及形成的包合物在药剂上的应用； 4. 了解包合物的制备方法及其优缺点。 二、基本概念 包合物（inclusion compound）:药物分子被包嵌于另一种物质分子的空穴结构内形成的包合体，由主分子（host molecule）和客分子（guest molecule）两部分组成。主分子为具有一定空穴结构的药用材料，小分子药物作为客分子被包合在主分子内，形成分子囊。药物被包合后，其物理学和生物学性质（包括药物的溶解度、溶出速率、口服生物利用度等）发生改变。 姜黄素的相对分子质量为368.37，为橙黄色结晶粉末，味稍苦。不溶于水，溶于乙醇、丙二醇，易溶于冰醋酸和碱溶液，在碱性时呈红褐色，在中性、酸性时呈黄色。对还原剂的稳定性较强，着色性强(不是对蛋白质)，一经着色后就不易退色，但对光、热、铁离子敏感，耐光性、耐热性、耐铁离子性较差。 三、包合物常用材料 常见材料有环糊精、淀粉、胆酸、纤维素、蛋白质、核酸等。 环糊精（cyclodextrin，cyd） 环糊精系淀粉用嗜碱性芽胞杆菌经培养得到的环糊精葡萄糖转位酶作用后形成的产物，是由6～12个d-葡萄糖分子以1，4-糖苷键连接的环状低聚糖化合物，为水溶性白色结晶状粉末。cyd对酸较不稳定，但比淀粉和非环状小分子糖类耐酸；对碱、热和机械作用都相当稳定。cyd与某些有机溶剂能形成复合物而沉淀，可以利用各种cyd在溶剂中溶解度不同而进行分离环糊精衍生物。常见的环糊精是由6、7、8个葡萄糖分子、通过α-1，4苷键连接而成的环状化合 物，分别称之为α-cyd、β-cyd和γ-cyd.其中以β-cyd 的空洞大小为适中，因此最为常用。 　　cyd的立体结构是上窄下宽两端开口环状中空圆筒形状，空洞外部分和入口处为椅式构象的葡萄糖分子上的伯醇羟基，具有亲水性，空洞内部由碳-氢键和醚键 构成，呈疏水性，故具有某些特殊性质，能与一些小分子药物形成包合物。药物与cyd所形成的包合物通常都是单分子包合物，药物在单分子空 穴内包入，而不是在材料晶格中嵌入。大多数cyd与药物可以达到摩尔比1：1包合。无机药物大多不宜用cyd包合，分子量在100～400之间的有机药物 则宜用cyd包合。包合物在水溶液中与药物呈平衡状态，如加入其他药物有机溶剂，可将原包合物中的药物取代出来，即具有竞争性。 β-环糊精衍生物　　本次试验使用β-环糊精。β-cyd在水中溶解度较低，所形成的包合物最大溶解度仅为1.85%，使其在药剂中的应用受到一定的限制。如将甲基、乙基、羟丙基、羟乙基等基团引入β-cyd分子中与羟基进行烷基化反应，可改变β-cyd的理化性质。亲水性β-cyd衍生物能与多种药物起包合作用，使难溶性药物的溶解度增加，毒性与刺激性下降。疏水性β-环糊精衍生物主要为乙基化β-环糊精（e-β-cyd），将水溶性药物包合后降低其溶解度，可用作水溶性药物的缓释载体。 四、制备方法 包括:饱和水溶液法、研磨法、冷冻干燥法、溶液-搅拌法、喷雾干燥法、超声波法 饱和水溶液法，亦称为重结晶法或共沉淀法。是将cyd制成饱和水溶液，加入客分子药物，对于那些水中不溶的药物，可加少量适当溶剂（如丙酮等）溶解后，搅拌混合30min以上，使客分子药物被包合，但水中溶解度大的客分子有一部分包合物仍溶解在溶液中，可加一种有机溶剂，使析出沉淀。将析出的固体包合物过滤，根据客分子的性质，再用适当的溶剂洗净、干燥，即得稳定的包合物。 工艺流程：称取姜黄素0．2 g，溶解于50 mL无水乙醇中，60℃ 下，滴人100 mLβ一环糊精饱和水溶液(31．8 g·L )中，搅拌1 h，停止加热，室温冷却静置后过滤，沉淀干燥。 影响包合物质量好坏的因素：乙醇的浓度、加热温度、搅拌时间、投料比、低温放置时间等，可以通过正交设计实验来确定最佳制备条件。 五、质量评价 包合物收率： 包合物收得率=包合物实际质量／(β-环糊精+姜黄素)投料量。 包封率：采用紫外分光光度法 姜黄素标准曲线：精称姜黄素1 mg，用无水乙醇溶于100 ml容量瓶中，定容，即为标准溶液。分别取标准溶液1.00ml、2.00ml、3.00ml、4.00ml、5.00ml加无水乙醇定容至10ml，在421 nm处测定吸光度值。 包合物指标测定：精密称取包合物20mg，加无水乙醇溶解，10ml容量瓶中定容，精密吸取0.50 ml于100ml容量瓶中，加无水乙醇至刻度，于421 nm处测定吸光度，计算包合物中姜黄素的含量。包合物中姜黄素的含量=包合物中姜黄素的质量／包合物质量。 除此之外，还有显微镜法和电镜扫描法