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项目八 分枝杆菌属庞明珍 分枝杆菌是一类细长略带弯曲的杆菌，含有分枝菌酸，有分枝生长的趋势 而得名。具有抗酸性，故又称抗酸杆菌。 人结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌对人类致病。人型结核分枝杆菌感染的发病率最高。 由于结核分枝杆菌的耐药和AIDS发病率呈上升趋势，结核病成为危胁人类健康的一个严重的全球性公共卫生问题。 第一节 结核分枝杆菌 一、临床意义 (一)致病物质是荚膜、脂质和蛋白质。 (二)所致疾病 通过呼吸道、消化道和损伤的皮肤等多途径 感染机体，引起多种脏器的结核病，其中以肺结 核为多见。 (三)免疫性 有菌免疫或称传染性免疫，细胞免疫在抗感染免疫中起重要作用。 二、微生物特性 分枝状，略带弯曲的抗酸杆菌，抗酸性染色法染色后结核分枝杆菌呈红色，背景呈蓝色。菌体外有荚膜。 专性需氧，营养要求较高，最适生 长温度为35℃，生长缓慢, 2~5w才出 现肉眼可见的如菜花样粗糙型菌落。 抵抗力较强。耐干燥，在干燥的痰内生存6～8个月，对化学消毒剂的抵抗力较强，在3％HCl或6％H2SO4中不被杀死，对湿热敏感,在70％～75％乙醇中数分钟即被杀死。 变异性 形态结构变异 毒力变异 耐药性变异 三、微生物学检验 1．标本：清晨第一口痰送检。无菌抽取脑脊液、胸水、腹水及关节液等盛无菌试管送检，采集脓液应直接从溃疡处取脓汁或分泌物。 2．直接涂片染色镜检 痰涂片要厚，齐-尼抗酸染色后，观察至少100个视野，结核分枝杆菌抗酸染色后呈红色，其他细菌和细胞为蓝色。结果应报告“找到或未找到抗酸性杆菌”，而不能报告“找到结核分枝杆菌”。 3.核酸检测 用PCR法快速诊断结核分枝杆菌感染,特异性与敏感性均大于95％。 4.抗PPDIgG的检测 用ELISA法检测患者血清中抗PPDIgG，可作为活动性结核分枝杆菌感染的快速诊断方法，阳性率为80％～90％。 5.分离培养 标本接种于选择性固体培养基中，常用罗 琴培养基，所含的孔雀绿或青霉素可抑制杂 菌生长37℃，5％~10％CO2培养8周，如果出 现干燥呈颗粒状、灰白色菌落，涂片染色为 抗酸阳性，多数是结核杆菌。 6.鉴定 (1)PCR反向膜探针杂交EHSA法(PCR杂交梳) (2)DNA探针 (3)16s rRNA基因序列测定 (4)高效液相色谱(HPLC)检测 7.药物敏感性试验 将纯培养物菌悬液，接种含各种浓度药物的固体培养基上，同时做不含药物的对照组。经过培养，含有药物的培养基上菌落数目是对照组的75％以上，则认为该菌对该药物浓度为完全耐药，如无菌落生长则为敏感。 四、结核菌素试验 原理：纯蛋白衍生物(PPD)，是用三氯醋酸沉淀结核菌培养滤液后的纯化物。注入皮内后如受试者已感染结核，则结核菌素与致敏淋巴细胞特异性结合，形成迟发型超敏反应性炎症。 应用： ①选择BCG接种对象及测定接种效果，结核菌素反应阴性者应接种BCG； ②结核菌素试验对婴幼儿可做诊断结核病之用； ③在末接种BCG的人群中作结核分枝杆菌感染的流行病学调查； ④可借用其测定肿瘤病人的细胞免疫功能。 第二节 非典型分枝杆菌 指结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌。因具有抗酸性，故又称非典型抗酸性菌。 广泛分布于外环境和人及动物的机体中。已发现17种以上能引起人类疾病，引起的肺部感染。 —、光产色分枝杆菌 二、暗产色分枝杆菌 三、不产色分枝杆菌 四、迅速生长分枝杆菌 第三节 麻风分枝杆菌 麻风病的病原菌，麻风是一种慢性传染病，主要表现为皮肤、粘膜和神经末梢的损害。晚期可侵犯深部组织和器官，形成肉芽肿。 根据临床表现、免疫病理变化和细菌检查结果等将麻风分为瘤型、结核样型和界限类综合征等三种病型。 抗酸杆菌，呈束状或团状排列， G+无鞭毛、荚膜和芽胞。用药后细菌可断裂为颗粒状、链杆状等，着色不均匀，叫做不完全菌。 * *