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湖北三峡职业技术学院《食用菌生产技术》课程组 【2-3】 二级菌种制作技术 湖北三峡职业技术学院《食用菌生产技术》课程组 【2-1】 菌种生产基础 【单元3】二级菌种制作技术 【模块2】食用菌菌种制作技术 《食用菌生产技术》 湖北三峡职业技术学院《食用菌生产技术》课程组 【单元3】二级菌种制作技术 【模块2】食用菌菌种制作技术 湖北三峡职业技术学院《食用菌生产技术》课程组 二级菌种的制作流程 1 二级菌种培养基的配制 2 二级菌种培养基的灭菌 3 二级菌种的接种 4 二级菌种的培养 5 二级菌种的质量鉴定 6 一、二级菌种制作流程 配制培养基 灭 菌 二级菌种 培 养 接 种 一级菌种 一、二级菌种制作流程 二、 二级菌种培养基的配制 (一)培养基配制原则 1.选择适宜的营养物质。 2.营养物质间配制的比例要恰当。 3.选择经济实用、来源广泛的原料。 4.适宜的pH值和含水量。 二、二级菌种培养基的配制 (二)培养基常用配方 木屑培养基 阔叶树木屑 78% 麸皮(或米糠) 20% 蔗 糖 1% 石膏粉 1%料水比 1:1.1~1.3 棉籽壳培养基 棉籽壳 78% 麸皮(或米糠) 20% 蔗 糖 1% 石膏粉 1% 料水比 1:1.1~1.3 注:其它配方参见课本 二、二级菌种培养基的配制 (三)培养基配制步骤 1.不溶性主、辅料混拌均匀 2.可溶性辅料溶于水后拌入主辅料 3.注意检查含水量(手测法等) 比实际要求的pH值调高1左右 容器:菌种瓶、菌种袋 要求:上紧下松,外紧内松,中间一个洞 称料 拌料 调节pH值 分装培养料 清洁(洗或擦)瓶、袋外壁 封口 二、二级菌种培养基的配制 三、 二级菌种培养基的灭菌 1.灭菌方法及要求   高压蒸汽灭菌:   压力1.5kg/cm2,温度126~128℃,时间1~2h(种木、谷粒和经过堆制发酵的粪草培养基应达到2~2.5h)。   常压蒸汽灭菌:   100℃,保持10~12h(攻头,控中,保尾)。 三、二级菌种培养基的灭菌 卧式高压蒸汽灭菌锅   2.灭菌效果检验   随机取几瓶(袋)置于25~30℃温度下空白培养4~6天,会出现以下情况:   全部感杂   少数感杂   全部没有杂菌 分析原因 ? 三、二级菌种培养基的灭菌 四、二级菌种的接种 概念:菌种移至新培养基上的过程 关键:无菌操作 接种 接种环境消毒灭菌 酒精棉球消毒双手 操作器具消毒灭菌 开启的管口、瓶口靠近灯焰 拔出的棉塞勿触及任何地方 动作快、准、稳 无菌 操作 要点 四、二级菌种的接种 清洁 药物消毒后,再用紫外灯照射 接种室(箱)的接种程序 消毒处理 放入接种物品 接种操作 室(箱)后处理 无菌操作、接毕及时贴好标签、避免错种 接种完毕及时清理清洁,并用75%酒精或新洁尔灭溶液擦试消毒。 净化工作台的接种程序 物品的摆放要便于接种操作 用75%酒精表面擦拭消毒? 开机预净20 min ?接种操作 四、二级菌种的接种 接种方法 注 意 用接种耙取蚕豆大母种放于瓶中料面上。 勿接入表面老菌丝及老种块。 一支母种移植扩大原种不应超过6瓶(袋)。 1. 从具有相应技术资质的供种单位引种,且种性清楚。不应使用来历不明、种性不清、随意冠名的菌种和生产性状未经系统试验验证的组织分离物作种源生产菌种。 2. 严格挑选待接的菌种质量。 四、二级菌种的接种 五、 二级菌种的培养 菌种的培养实质就是对菌丝体的培养 培养条件 场所预先清洁、消毒、灭虫 空气清新 光线暗(避光) 温度约20~24℃(因种而异) 空气湿度75%以下 五、二级菌种的培养 培养方法 勿堆放过挤 适时检查,及时剔除污染瓶(袋) 控制菌龄(菌丝长满7~10天后使用) 五、二级菌种的培养 六、 二级菌种的质量鉴定 菌丝白(或呈该菌种应有的颜色) 均匀、粗壮、有菇香味 接种后萌发快 无杂色、无黄水、无结皮、无原基、无干缩脱壁等现象 合格菌种   不同的食用菌,原种和栽培种的形态特征各不相同,可以此作为菌种鉴定的依据。 六、二级菌种的质量鉴定 常见食用菌的特征介绍:参见教材 菌种出售必须贴有菌种质量合格标签,标明菌种种类、级别、品种、生产单位和接种日期。 无论哪一类、哪一级菌种均应杜绝培养基上或棉花塞和瓶(袋)颈交接处有杂色色斑。 六、二级菌种的质量鉴定 菌种的选购   1.要选择从具有相应资质的供种单位购买。同时,索要相关的技术资料。   2. 应咨询所购菌种的种类、品种、级别、培养基种类、接种日期、保藏条件、保质期等,对所购菌种做到心中有数。   3.对菌种质量的外观进行鉴

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