专题1.1 DNA重组技术的基本工具（修改3）20PPT.ppt

小环，是质粒，也细菌的核外DNA，能够独立复制 * 有一种细菌叫做苏云金杆菌，苏云金杆菌的DNA有一个毒蛋白基因，这个基因转录翻译出来的蛋白质就是毒蛋白，如果把毒蛋白基因导入到棉花细胞中，就定向地改造了棉花的遗传性状，棉花具有毒蛋白基因，就能产生毒蛋白，害虫如果吃了含有毒蛋白的棉花细胞，害虫就死亡了，抗虫棉是害虫吃了棉花后死亡了，并不是说害虫不吃 虫子吃了棉花叶子，就会被毒死，现在再来理解基因工程的概念 * * * 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因(如抗虫基因),送入受体细胞(如棉细胞),还需要有运输工具,这就是运载体。 常用的运载体：质粒、噬菌体和动植物病毒； 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒。 质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，包括真核生物的细胞器和细菌细胞中核区外的DNA分子。现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中核以外的DNA分子。 质粒是基因工程最常用的运载体。 绝大多数细菌质粒都是闭合环状DNA分子。有的一个细菌中有一个，有的一个细菌中有多个。 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，其中常含有抗药基因，如四环素的标记基因。 质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用，但复制只能在宿主细胞内成。 2.质粒的存在对宿主细胞无影响； 3.质粒的复制只能在宿主细胞内完成。 * 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 　被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端？ 现在有两段来源不同的DNA，这两段DNA恰好都有一段序列是GAATTC,，如果用同种限制酶切割，加入都是ECOLI限制酶，都会产生相同的黏性末端，选择这两个片段的DNA用DNA连接酶，就可以把他们连接在一起，通过这个操作就可以把来源不同的两个DNA连接在一起 ——谢金辛 【温馨提示】请拿出你的课本，还有最最重要的激情！ 专题1.1 DNA重组技术的基本工具 本节聚焦： 理解三种工具 认同理论技术 一、DNA重组技术的定义 （一）概念：又称基因拼接技术或DNA重组技术 通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的性状。 操作环境 操作水平 操作对象 原理 目的 体外 分子 DNA 基因重组 定向改造 生物 遗传性状 （二）基因工程的工具 1“分子手术刀” →限制性核酸内切酶 ①来源：主要是微生物 ②特点：A 对外切，不对内切 B 专一性（特定部位） 专一识别GAATTC序列，在G和A之间将这段序列切开，产生两个相同的黏性末端。 EcoRⅠ酶 规律：反向 对称 重复 排列 EcoRⅠ的名称如何来？ T4DNA连接酶 2“分子缝合针” →DNA连接酶 T4DNA连接酶 E·coli DNA 连接酶 限制酶和连接酶都作用于什么部位？ 碱基之间的氢键自动断裂和形成 磷酸二酯键 限制酶和连接酶作用的都是 连接“梯子”断口的“扶手”， 而非“梯子”中间的“踏板”。 类型：质粒、噬菌体和动植物病毒 作用：将目的基因导入受体细胞 3“分子运输车”基因进入受体细胞的载体 肥胖基因 条件： ①具有多个限制酶切位点 ②具有标记基因便于筛选 ③在受体细胞内大量复制 ④对受体无害且稳定存在 小环，是质粒，也细菌的核外DNA，能够独立复制 * 有一种细菌叫做苏云金杆菌，苏云金杆菌的DNA有一个毒蛋白基因，这个基因转录翻译出来的蛋白质就是毒蛋白，如果把毒蛋白基因导入到棉花细胞中，就定向地改造了棉花的遗传性状，棉花具有毒蛋白基因，就能产生毒蛋白，害虫如果吃了含有毒蛋白的棉花细胞，害虫就死亡了，抗虫棉是害虫吃了棉花后死亡了，并不是说害虫不吃 虫子吃了棉花叶子，就会被毒死，现在再来理解基因工程的概念 * * * 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因(如抗虫基因),送入受体细胞(如棉细胞),还需要有运输工具,这就是运载体。 常用的运载体：质粒、噬菌体和动植物病毒； 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒。 质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，包括真核生物的细胞器和细菌细胞中核区外的DNA分子。现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中核以外的DNA分子。 质粒是基因工程最常用的运载体。 绝大多数细菌质粒都是闭合环状DNA分子。有的一个细菌中有一个，有的一个细菌中有多个。 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，其中常含有抗药基因，如四环素的标记基因。 质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用，但复制只能在宿主细胞内成。 2.质粒的存在对宿主细胞无影响； 3.质粒的复制只能在宿主细胞内完成。 * 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 　被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的