石河子大学烟草浸泡液对大蒜根尖细胞微核的诱变效应.docVIP

遗传学实验自主设计性实验 实 验 名 称：烟草浸泡液对大蒜根尖细胞微核的诱变效应 专 业 年 级： 2010级农学一班 成 员 及 学 号： 孙国乐 2010512036 孙文庆 2010512024 _______ 陈 才 2010512003 ______ 烟草浸泡液对大蒜根尖细胞微核的诱变效应 成员及学号：孙国乐2010512036 孙文庆2010512024 陈才2010512003 摘要： 本实验用大蒜根尖细胞微核技术检测同一种类香烟对微核的诱变效果。设置了不同浓度的香烟剂量分别对每组大蒜根尖进行处理。结果发现香烟的剂量在对微核千分率大小方面影响明显，由此说明香烟具有诱导微核产生的作用。 关键字：大蒜根尖； 香烟； 微核； 微核千分率 前言 随着现代社会的发展，越来越多的化学物质运用到人们的日常生活之中，如各种香烟的烟气量。而其中有些物质具有较强的危害，如致畸，致癌，致突变性。为了检测已存在或潜在的危害，各种检测技术应运而生。微核试验是检测染色体或有丝分裂器损伤的一种遗传毒性试验方法。无着丝粒的染色体片段或因纺锤体受损而丢失的整个染色体，在细胞分裂后期仍留在子细胞的胞质内成为微核。用微核试验来评价药物、放射线、有毒物质等对人体细胞或体外培养细胞遗传学损伤仍是一个直观有效可行的方法,在遗传毒理、医学、食品、药物、环境等诸多方面得到了广泛的应用。微核技术经济,迅速,简便,不需要特殊技能,可以统计更多的细胞。我们采用大蒜作为实验材料，采用植物微核技术来观察香烟对大蒜根尖微核千分率的影响进而来映射香烟中的化学物质对人体是否产生危害。 香烟是日常生活中经常接触到的东西，其市场在中国乃至世界也是相当巨大的，在超市中我们可以看到各种品牌各种样式的香烟。另一方面，在各媒体的报道中，经常出现有关香烟的危害，但是我国的烟民量却居高不下，所以这也是我们进行本实验的一个原因。 物化因素可以对染色体发生影响，从而使生物的性状产生变异。它们可以引起染色体在数量和结构上发生变化，还可导致微核的产生。 微核是真核生物细胞中的一种异常结构，在间期呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应在主核的1/3以下。微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的断片产生，一整条或好几条染色体也能产生。这些断片或染色体在细胞分裂末期被两个子细胞核所排斥，便形成了第三个核块。 实验材料和方法 1.1、实验材料：烟草、大蒜根尖、卡诺固定液、自来水、盐酸、改良苯酚品红溶液、青霉素小瓶、显微镜、计算机、载玻片、盖玻片、培养皿 1.2、实验方法和步骤： 1、浸种催芽 (取大蒜若干，等分为六组，分别标记为1、2、3、4、5、6号，然后放在培养皿中加水使其发芽。 (待大蒜发芽后，分别将一根、一根半、两根、两根半、三根、三根半烟的量依次放入由小到大标号的培养皿中对大蒜芽进行处理。 (一段时间大蒜根尖长至2-3cm后，取出大蒜，将其所发的芽剪下，放在标有相应标号的青霉素小瓶中，加入固定液，然后放入冰箱冷藏24小时。 (约24小时后， 取出青霉素小瓶准备实验。 2、解离 分别在青霉素小瓶中对供试采料大蒜根尖水洗3遍，弃去水。再加入1mol/L盐酸，放入60°C恒温箱解离10min后，弃去盐酸，水洗根尖3遍。 3、染色 取一根尖于载玻片上，切取生长点部位，弃去其余部分。加一滴改良苯酚品红溶液，边用镊子夹碎边染色10min，再加上盖玻片。 4、制片 吸水纸包住盖玻片和载玻片，镊柄敲碎，敲至材料呈云雾状即可，然后对每个标号的大蒜根尖按以上步骤制两个玻片。 5、镜检 观察微核的细胞形态，并进行拍照，在每个根尖中数1000个细胞，统计其中微核的个数；另外统计不同剂量与微核率的关系。 2、实验结果与分析 2.1显微镜下图片 大蒜根尖实验组1 大蒜根尖实验组1 微核细胞（1） 微核细胞（2） 大蒜根尖实验组2 大蒜根尖实验组2 微核细胞（1） 微核细胞（2） 大蒜根尖实验组3 大蒜根尖实验组3 微核细胞（1） 微核细胞