寄生虫感染的免疫诊断附核酸诊断-四川大学课程中心.DOC

18 寄生虫感染的免疫诊断（附核酸诊断） 18.1 免疫诊断在寄生虫病诊断中的地位??? 寄生虫病的诊断，传统的方法是应用寄生虫学实验技术，从患者的血液、粪便或其它排泄物以及组织中查见病原体而确诊。然而，有些寄生虫寄生于人体内的实质器官，进行寄生虫学检查取材不易，往往给疾病的确诊及鉴别诊断造成困难。并且，随着我国寄生虫病防治工作的进展和深入，寄生虫的感染率和感染度显著下降，用经典的寄生虫学方法亦不易查见病原体。这些都说明，发展一种更为敏感而特异的检测方法的必要性。寄生虫病的免疫诊断，主要是应用免疫学方法检查患者血循环中或体液中针对寄生虫的抗体或由寄生虫本身分泌排泄的抗原，方法大多较为敏感，可以检出微量存在的抗体或抗原，因之，对临床上疑似的患者，可提供诊断依据，有重要的辅助诊断价值；在寄生虫病防治工作中，可进一步查清病人，监测疫情变化并评价防治工作效果。所以在寄生虫学范畴内，免疫学的检测方法日益受到重视，并被列为重要的查病方法。18.2 寄生虫病免疫诊断简介??? 寄生虫病免疫诊断的价值，主要根据以下几个指标：所用的方法需有足够的敏感性，能以查出绝大多数的病人；有较好的特异性，对其它寄生虫病很少发生交叉反应，健康人无假阳性；能用于疗效考核，病人经有效治疗后阴转较快；能反映病情，可以定量；方法简便易行、经济，可以在基层推广。??? 当前，寄生虫病的免疫诊断，主要是应用已知的抗原检测患者血液中或其它体液中相应的抗体。在有些虫种，如血吸虫病，疟疾、丝虫病，华支睾吸虫病，并殖吸虫病和猪囊虫病等的诊断中已应用特异的多克隆抗体或单克隆抗体(McAb)进行循环抗原的检测研究，并成功地试用于现场。??? 免疫诊断用的抗原，可以是寄生虫生活史中的任何一个阶段，例如，血吸虫的虫卵，毛蚴、尾蚴以及成虫均可用作诊断抗原。诊断用的抗原，可以是整虫，虫体的石蜡切片或冰冻切片，有不少方法是应用寄生虫的不同发育阶段的组织匀浆或提取物——可溶性抗原，也有使用虫的排泄分泌物作为抗原(代谢抗原)。例如，血吸虫病诊断用的环卵沉淀试验和尾蚴膜试验是采用完整的虫卵及尾蚴；间接免疫荧光试验，既可用整虫，也可用虫体的切片；而在皮内试验、免疫电泳、对流免疫电泳、间接血细胞凝集试验以及酶联免疫吸附试验等方法中所用的则都是寄生虫的可溶性抗原。??? 由于大多数的寄生虫属于多细胞动物，抗原成分相当复杂，在寄生虫的不同发育阶段，种、属、科甚至纲之间，都可能有共同抗原存在。如曼氏血吸虫与日本血吸虫之间，日本血吸虫与卫氏并殖吸虫之间，马来丝虫与犬恶丝虫、牛丝虫之间均已证实有共同抗原成分。抗原成分的部分共同性，诱发产生相应的抗体，因之，在免疫学试验时，势必出现交叉反应，从而降低了试验的特异性。这种缺点，唯有通过抗原的纯化来克服。抗原纯化的方法有：凝胶过滤(分子筛层析)、离子交换层析、亲和层析以及其它的化学方法等。通过纯化去除共同的组分，获取虫种特异的抗原成分。但在特殊情况下，如某种寄生虫抗原材料缺乏时，往往可借助有共同抗原成分的异种抗原进行辅助诊断，例如：国内曾用牛丝虫抗原的间接荧光抗体试验诊断人丝虫病，用日本血吸虫卵进行环卵沉淀试验诊断曼氏血吸虫病。??? 人体针对寄生虫的特异性抗体，经过病原有效治疗后，将持续存在一段时间，并不立即转阴。阴转速度的快慢，与采用的试验方法的敏感性以及治疗前的感染状况有关。在分析阳性结果时应充分考虑这一点，尤以在经过寄生虫病反复防治的地区更应如此。在宿主血流中的循环抗原系来源于存活的虫体本身，它们是虫体的分泌、排泄和脱落性抗原，近年来循环抗原的检测已经受到极大的重视。实验研究表明，检测循环抗原比检测抗体具有更多的优越性，它能反映活动性感染，有较好的疗效考核价值，是寄生虫病免疫诊断发展的重要方面。一般认为，寄生虫病免疫诊断的阳性结果，只能起辅助诊断的作用。临床应用时，应结合病史，症状及体征，进行综合分析。为了提高诊断效果，在有条件的地区，可以同时应用两种免疫学方法进行检测，以取长补短，提高可靠性。方法的选择，可根据各地的具体条件而定。18.3 免疫诊断方法在几种寄生虫病中的应用及评价18.3.1 阿米巴病??? 阿米巴病血清学诊断方法的最大价值是为肠外阿米巴病，特别是为局部症状及体征不明显的肝脓肿、右下叶以外的肺脓肿、心包炎及脑脓肿等提供确诊的依据。在临床上，阿米巴肝脓肿与肝癌及细菌性肝脓肿的症状、体征和某些检验结果，往往非常相似，有时即使从肝中抽出脓液，但由于不易在脓液中查出阿米巴原虫，而使诊断混淆，此时免疫诊断方法就有重要价值。至于肠道阿米巴病的诊断，仍需结合粪检，反复查找病原体，在血清学试验阳性时，尤应如此。因抗体在治愈后的阴转尚需相当时间，所以对阿米巴病血清学试验的阳性，必须结合临床表现作出判断，在阿米巴病发病率