[工学]04核酸化学.ppt

讲师：赵丹丹 第4章 核酸化学 生命科学学院 赵丹丹 本章内容 4.1 概述 4.2 核苷酸 4.3 DNA结构 4.4 RNA结构 4.5 核酸的性质 4.6 核酸的分离、纯化和鉴定 4.1 核酸概述 一、核酸的发现和研究简史 （1）核酸的发现 （2）核酸的早期研究 （3）DNA双螺旋结构模型的建立 （4）生物技术的兴起 （5）人类基因组计划开辟了生命科学新纪元 二、核酸的化学组成 主要由C、H、O、N四种元素组成 ； 还含有较多的磷和少量的硫； 磷的含量为9%～10%（约为 9.5% ）。含磷高是核酸组成元素的特点，可用定磷法来测核酸的含量。 三、核酸分类 4.2 核苷酸（Nucleotides） 一、核苷酸是构成核酸的基本组成单位 二、核酸中的戊糖 三、碱基（base） 定义：含氮碱基是核酸中含氮的碱性杂环化合物。 核酸中的碱基分两类： 1、嘌呤(purine) 2、嘧啶(pyrimidine) 3、碱基的互变异构体 含氧的碱基有鸟嘌呤和3种嘧啶碱，它们在一定条件下存在酮式结构或烯醇式结构；含氨基的碱基存在胺型和亚胺型的结构。 在生理条件下，酮式和胺型是优势结构，其含量比烯醇式和亚胺型要多得多。 4、稀有碱基（Minor bases ） 除了上述5种常见碱基以外，核酸中还有一些不常见的稀有碱基 以甲基化尤为常见： m代表甲基，右上角数字为甲基所在位置，右下角数字为甲基数目。 如：m3 3,3,7G为N3，N3，N7-三甲基鸟苷。 参与核苷酸代谢 次黄嘌呤（6-羟基嘌呤） 黄嘌呤（2,6-二羟基嘌呤） 尿酸（2,6,8-三酮基嘌呤） 四、核苷（ribonucleoside ） 核苷是一种糖苷，由戊糖和碱基缩合而成。糖苷键由戊糖的半缩醛羟基与碱基上的N原子缩合而成，N-苷键。 五、核苷酸（nucleotide ） 定义：核苷与磷酸形成的磷酸酯称为核苷酸。 核苷酸是核酸的基本结构单位： 在RNA中是核糖核苷酸 在DNA中是脱氧核糖核苷酸 生物体内游离的核苷酸主要是5′-核苷酸 和5′-脱氧核苷酸，它们比2′-核苷酸和3′-核苷酸都稳定。 1、核苷酸的结构通式 2、核苷酸的生物学功能 核苷酸是核酸生物合成的底物 细胞中重要的能量暂存和传递物质 环核苷酸调节物质代谢 含核苷酸的生物活性物质 （1）核苷酸是核酸生物合成的底物 RNA生物合成的底物是：NTP（A U C G） DNA生物合成的底物是：dNTP（A T C G） （2） 细胞中重要的能量暂存和传递物质 α、β、γ三个磷酸键中 β、γ是高能磷酸键，水解时可以释放较多的自由能。 （3）环核苷酸调节物质代谢 环腺苷酸（cAMP）和环鸟苷酸（cGMP）都是 一分子磷酸与核酸的3′-羟基和5′-羟基失水形成环状磷酸酯。 环核苷酸往往是细胞功能的调节分子和信号分子。 （4）含核苷酸的生物活性物质 NAD+、NADP+、FAD 、CoA-SH等 4.3 DNA的结构（Structure of DNA） 一、核酸中核苷酸的连接方式 3′, 5′- 磷酸二酯键（phosphodiester bond） 即磷酸分子的一个羟基与一个核苷的核糖C-3′位羟基缩合成酯，该磷酸分子的另一个羟基与第二个核苷的核糖C-5′位羟基缩合成酯。 二、碱基组成的Chargaff规则 Chargaff发现DNA碱基组成的规律，称为Chargaff规则。 DNA的碱基组成具有生物物种的特异性，不同物种的DNA有其独特的碱基组成。 同一物种不同组织和器官的DNA碱基组成是一样的，不受生长发育、营养状况以及环境条件的影响。 （1）腺嘌呤和胸腺嘧啶的摩尔数相等，即Ａ＝Ｔ； （2）鸟嘌呤和胞嘧啶的摩尔数也相等，即Ｇ＝Ｃ； （3）含氨基的碱基（腺嘌呤和胞嘧啶）总数等于含酮基的碱基（鸟嘌呤和胸腺嘧啶）总数，即Ａ＋Ｃ＝Ｇ＋Ｔ； （4）嘌呤的总数等于嘧啶的总数，即Ａ＋Ｇ＝Ｃ＋Ｔ。 三、DNA的一级结构 定义：组成DNA的核苷酸的排列顺序。 由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所以也称为碱基序列。 化学键： 3′, 5′- 磷酸二酯键 形状：直线形或环形多聚体 四、DNA的高级结构 DNA的二级结构-双螺旋结构 DNA双螺旋结构模型要点 DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装 DNA的超螺旋结构 原核生物DNA的高级结构 DNA在真核生物细胞核内的组装 1、DNA的二级结构 1953年，James.Watson和Francis.Crick提出了DNA二级结构模型——双螺旋结构模型。 主要有三方面的依据： 一是已知核酸化学结构和核苷酸键长与键角的数据； 二是Chargaff发现的DNA碱基组成规律，显示碱基间