海水养殖动物病害学课件-第3章节免疫学原理与应用幻灯片.ppt

免疫应用：免疫学方法 （四）荧光和化学发光免疫技术 A. 荧光免疫技术 1. 定义：用荧光素（如异硫氰酸荧光素、四乙基罗丹明和四甲基异硫氰酸罗丹明）标记来检测抗原抗体反应的免疫分析技术。 2. 种类：包括荧光免疫组织化学(如荧光抗体)技术和荧光免疫测定。 B. 发光免疫分析 定义：利用物质的发光特征(如辐射光波长、发光的光子数)与产生辐射的物质分子的结构常数、构型、数量等密切相关，通过受激分子发射的光谱，发光衰减常数、发光方向等来判断该分子的属性；通过发光强度来判断物质的量的免疫分析技术。 免疫应用：免疫学方法 （五）免疫电镜技术 1. 定义：在保持抗体免疫性的前提下，用高电子密度的标记物（如铁蛋白、金等），或用经细胞化学方法处理使电子密度增高的标记物（如辣根过氧化物酶等酶类）标记抗体后，将标记抗体与相应抗原结合，然后用电子显微镜观察的技术。又称电子显微镜免疫细胞化学技术。 2. 种类： (1) 非包埋法免疫染色：该法是以超薄冷冻切片免疫染色。因该法不经脱水和包埋等步骤，抗原保护较好，且有利于免疫试剂在组织中的渗透；但在技术上困难较多，需配制专用设备。 (2) 包埋前免疫染色：组织固定? 厚切片?免疫染色 ?包埋 ?超薄切片? 投射电镜观察。 (3) 包埋后免疫染色：组织固定? 包埋?超薄切片?免疫染色? EM观察。 免疫应用：免疫学方法 第五节 免疫学原理在鱼虾病害防治中的应用 一、用于疾病的诊断 （免疫诊断方法有二类） 1.用已知抗原诊断病原：用已知抗原与从患病动物中提取的抗体进行血清学反应，以确定病原种类。该法只能用于病体已产生抗体的诊断。 2.用已知抗体诊断病原：将已知抗体与从病体中分离的病原进行血清学反应，以确定病原的种类，该法适于所有被诊断动物。 诊断方法 特点 抗体检测量 应用范围 血清中和试验 灵敏度高，费时 ≥10-3?g/ml 病毒病 沉淀反应 方便可靠，灵敏度低 ≥20 细菌病 补体结合试验 灵敏度高，存在干扰 ≥10-1 细菌病 凝集反应 快速准确，应用局限 ≥3?10-2 部分细菌病 免疫荧光 快速方便，需特殊仪器 ≥20 细菌病 放射免疫测定 快速灵敏，需特殊仪器 ≥10-3 病毒病 ELISA 快速灵敏，应用前景好 ≥10-3 细菌病 免疫：免疫学原理的应用 二、用于疾病的治疗 利用被动免疫，即给患病动物接种抗体进行应急治疗。 过程：先将抗原（疫苗）注入同种或其他种动物机体，1-4周后从接种动物的血液等部位提取抗体（或制备卵黄抗体），并将提取的抗体接种到患病动物中进行疾病治疗。 三、用于疾病的预防 水产动物免疫最重要的应用方向为研制疫苗进行疾病的预防 在水产养殖动物中，由于只有鱼类、两栖类和爬行类等脊椎动物 才能在接种抗原后产生抗体，目前因此也认为只有这些动物才能用免疫学方法进行疾病的预防。 免疫：免疫学原理的应用 （一）鱼用疫苗的种类 A. 根据疫苗的获得方法来分： 1. 死疫苗(灭活疫苗)：热灭活、化学灭活、紫外线灭活、超声灭活等 优点：安全性好，制造简单； 缺点：免疫剂量大，免疫持久性差。 2. 活疫苗：包括弱毒疫苗和异种疫苗 优点：弱毒疫苗 — 免疫原性好，免疫剂量少，持续时间长 异种疫苗 — 安全性好，免疫时间长。 缺点：弱毒疫苗 — 安全性差 异种疫苗 — 获得比较困难 3. 化学疫苗：以化学方法提取病菌有效成分(如LPS)制成 优点：免疫剂量小，免疫原性强，作用稳定； 缺点：制造较复杂，成本稍高。 免疫：免疫学原理的应用 4. 亚单位疫苗：病原微生物中能使机体产生免疫保护力的成分只占病原体小部分，将这些成分分离出来制成的疫苗为亚单位疫苗。 优点：可除去有害成分，减少异常反应，提高免疫效果； 缺点：制造过程复杂、成本高。 5. 基因工程疫苗：将病原的主要免疫原性蛋白的密码基因DNA 转移、重组后获得 优点：易于规模生产，成本低； 缺点：研究周期长，免疫原成分单一，产生抗体量小。 6. 合成疫苗：将具有保护性免疫力的人工合成肽与适当载体结合后，再加入佐剂制成的疫苗称为合成疫苗 优点：作用效果好，易于规模生产； 缺点：研究难度大。 免疫：免疫学原理的应用 B. 根据疫苗的性质和组成成分来分： 1. 单价疫苗：由单一病菌培养制备的疫苗 2. 多价疫苗：由同一种病菌的不同型或不同株培养制备的疫苗 3.