药分课件07苯乙胺类拟肾上腺素sm幻灯片.ppt

体内药物分析 (Bioanalysis) 动物组织中的盐酸克伦特罗残留的测定—瘦肉精 1.提取 称取动物肝脏组织样品5g?0.05g于带盖的聚四氟乙烯离心管中，加入乙酸乙酯15ml，再加入10.0%碳酸钠溶液3ml，然后以10 000r/min以上的速度匀质60秒，盖上盖子以5000r/min的速度离心2分钟，吸取上层有机溶剂于离心管中，在残渣中再加入乙酸乙酯10ml，在涡旋混合器上混合1分钟，离心后吸取有机溶剂并合并提取液。在收集的有机溶剂中加入0.10mol/L的盐酸溶液5ml，涡旋混合30秒，以5000r/min的速度离心2分钟，吸取下层水溶液，同样步骤重复萃取一次，合并两次萃取液，用2.5mol/L氢氧化钠溶液调节pH至5.2。 体内药物分析 (Bioanalysis) 动物组织中的盐酸克伦特罗残留的测定—瘦肉精 2.净化 SCX小柱依次用甲醇5ml、水5ml和30mmol/L盐酸5ml活化，然后将上述萃取液上样至固相萃取小柱中依次用水5ml和甲醇5ml淋洗柱子，在溶剂流过固相萃取柱后，抽干SCX小柱，再用4%氨化甲醇溶液5ml洗脱，收集洗脱液。 体内药物分析 (Bioanalysis) 动物组织中的盐酸克伦特罗残留的测定—瘦肉精 3.测定 (1)衍生化：在50℃水浴中用氮气吹干上述洗脱液，加入甲苯100?l和BSTFA(双三甲基硅烷三氟乙酰胺)100?l，试管加盖后于涡旋混合器上振荡30秒，在80℃的烘箱中加热衍生1小时(盖住盖子)；同时吸取标准工作液0.5ml加入到4%氨化甲醇溶液4.5ml中，用氮气吹干后同样品操作，待衍生结束后加入甲苯0.3ml转入进样小瓶中，进行气相色谱-质谱(GC/MS)分析。 (2)GC/MS测定参数：色谱柱HP-5MS 5%苯基甲基聚硅氧烷，30m×0.25mm(内径)，0.25?m(膜厚)；进样口温度220℃；进样方式不分流；进样体积1?l；柱温70℃(保持0.6分钟)，以25℃/min升温至200℃(保持6分钟)，以25℃/min升温至280℃(保持5分钟)；载气氦气；流速0.9ml/min(恒流)；GC/MS传输线温度280℃；溶剂延迟8分钟；EM电压高于调谐电压200V；离子源(EI)温度200℃；四极杆温度160℃；选择离子监测(m/z)86、212、262、277。 体内药物分析 (Bioanalysis) 动物组织中的盐酸克伦特罗残留的测定—瘦肉精 4.定性定量方法 (1)定性：样品峰与标样的保留时间之差不多于2秒，并人工比较选择离子的丰度，其中试样峰的选择离子相对强度(与基峰的比例)不超过标准相应选择离子相对强度平均值的?20％(m/z 262)和?50％(m/z 212、277)。 (2)定量方法：选择试样峰(m/z 86)的峰面积进行单点或多点校准定量。当单点校准定量时根据样品液中盐酸克仑特罗含量情况，选择峰面积相近的标准工作溶液进行定量，同时标准工作溶液和样品液中盐酸克仑特罗响应值均应在仪器检测线性范围内。 体内药物分析 (Bioanalysis) 动物组织中的盐酸克伦特罗残留的测定—瘦肉精 5.分析结果计算 试样中盐酸克仑特罗的含量按下式计算： 式中，X为试样中克仑特罗残留含量(?g/kg)；A为样液中经衍生化盐酸克仑特罗的峰面积；AS为标准工作液中经衍生化盐酸克仑特罗的峰面积；CS为标准工作液中盐酸克仑特罗的浓度(?g/L)；V为样品最终定容体积(ml)；m为最终样液所代表的试样量(g)。 第七章苯乙胺类拟肾上腺素 Phenethylamine 结构 (Structure) 拟肾上腺素类药物，分子结构中具有苯乙胺基本结构 儿茶酚胺类 结构 (Structure) 化学性质 (feature) 酚羟基特性：邻苯二酚（或苯酚）结构，与金属离子络 合呈色；在空气中或遇光、热易氧化，色 泽变深；在碱性溶液中更易变色。 弱碱性：烃胺基侧链，仲胺氮－弱碱性 游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂；其盐可溶于水 光学活性：手性碳原子，具有旋光性。 苯环取代基特性：根据苯环取代基的电负性，最大吸收波长以254nm为中心红移或者蓝移 ；紫外、红外吸收特性进行定性、定量分析。 如盐酸克伦特罗、盐酸氨溴索--芳伯氨基 鉴别试验 (identification) 与三氯化铁反应 药物 三氯化铁 肾上腺素 Adrenaline 0.1mol/L盐酸液中显翠绿色，加氨试液显紫色，紫红色 盐酸异丙肾上腺素 Isoprenaline hydrochloride 深绿色，滴加新制5%碳酸氢钠液，显蓝紫色，红色 重酒石酸去甲肾上腺素 Noradrenaline bitartrate 翠绿色，加5%碳酸氢钠试液显蓝色，红色 盐酸去氧肾上腺素 Pheny