山东大学研究生国家精品课程基因工程学原理-概述.ppt

基因工程学原理 Genetic Engineering 山东大学免疫学研究所 马春红 三大重中之重高技术 生物工程技术（BT) 信息技术（IT） 新材料技术（纳米技术，NT） 基因工程技术是生物工程技术的重要组成 第一部分 基因工程概述 基本概念 发展历史 相关理论的复习 一、基本概念介绍 基因工程(genetic engineering)常和以下名称混用: 基因克隆(gene cloning); 分子克隆(molecular cloning); 基因操作(gene manipulation); 重组DNA技术(recombination DNA technique) 基因工程是现代生物工程体系中的重要组成 基因工程 蛋白质工程 细胞（组织）工程 酶工程 发酵工程 蛋白质工程的概念 在利用基因工程技术了解编码蛋白质的基因的基础上，对蛋白质的氨基酸序列、结构和功能进行分析;进而通过对蛋白质的结构、氨基酸序列的改造和翻译后的修饰等手段，改变甚至创造出新的和更有效的蛋白质。 蛋白质工程主要内容 主要目标 蛋白质氨基酸序列的分析 蛋白质晶体结构分析 蛋白质功能预测和分析 蛋白质组分析 细胞（组织）工程概念 利用工程学原理进行细胞生物学的基础,研究和制造使用活细胞的产品，包括组织工程和生物加工工程。 组织工程：利用移植的细胞、骨架、DNA、蛋白质或蛋白质片段替代或修复已受伤或损坏的组织和器官 生物加工工程： 利用活细胞生产生物医药产品。 组织工程——人造器官 干细胞：1999年4月， 美国的科研人员首次成功地从成年人骨髓的干细胞在体外培养分化出软骨、脂肪和骨骼细胞。标志着干细胞的研究取得了重大进展。 以这项技术为代表的组织工程的突破具有广阔的应用前景，在不远的将来为实现人造“器官”成为可能。 iPS细胞又称诱导多功能干细胞: 2007年11月日美科学家：利用人体皮肤细胞（OCT3/4, Sox2, c-Myc, Klf)---类胚胎干细胞 2008年4月，美国加利福尼亚大学科学家：实验鼠皮肤细胞----iPS细胞----分化成心肌细胞、血管平滑肌细胞及造血细胞。 2009年3月，英国和加拿大科学家：不借助病毒、安全将普通皮肤细胞转化为iPS细胞的方法 2009年4月，美国科学家首次对遗传疾病Fanconi 贫血症患者皮肤细胞中的基因缺陷进行了修补，进而将这些组织转化成了能扭转疾患病情的干细胞，从而在基因重组过程中，制造出了无遗传缺陷、功能强大的诱导多功能干细胞（iPS细胞），并再次定向诱导分化出纠正患者遗传性贫血所需的健康血液细胞。 2009年7月，中国上海和北京两个科学团队分别利用iPS细胞克隆出活体实验鼠，首次证明iPS细胞与胚胎干细胞一样具有全能性。 酶工程的概念 是酶学与工程学的相互渗透和结合所发展起来，以酶为研究对象，改造并应用酶的特异催化功能。目标就是通过工程化技术大规模生产和转化相应原料成为有用物质的技术。 酶工程的主要内容 酶的分离纯化 酶与细胞的固定化技术及反应器 酶制剂的发酵生产 酶分子化学修饰、遗传突变及结构改造 酶抑制剂与激活剂开发与研究 人工设计与合成模拟酶及酶分子 发酵工程 发酵工程属于生物技术的下游技术，是工业化大规模培养细胞、生产生物制品的一种技术。 传统的发酵工程主要用于微生物。现代生物技术还包括动物、植物细胞和工程菌的发酵培养。 根据目的及产物的不同，基因工程分为： 基因克隆：在基因水平上，根据人们的需要以人工的方法取得特定基因，在体外重组于载体DNA分子上，并将重组DNA转入受体细胞进行无性繁殖。 基因表达：在基因水平上，根据人们的需要以人工的方法取得特定基因，在体外重组于载体DNA分子上，并将重组DNA转入受体细胞表达目的蛋白并行使正常功能。 基因工程理论基础-2 （2） 1953年Watson和Crick ：DNA双螺旋结构 （3） 1958～1971年：先后确立中心法则,破译64种密码子，揭示了遗传信息的流向和表达确定了遗传信息的传递方式 1973年，Cohen等获得了抗四环素和新霉素的重组菌落TcrNer ----标志着基因工程的诞生。 （二）基因工程的发展 1976年Boyer等首先将人工合成的生长激素释放抑制因子somatostatin 14肽的基因重组入质粒，成功地在大肠杆菌中表达 1977年 美国南旧金山由博耶和斯旺森建立世界上第一家遗传工程公司，专门应用重组DNA技术制造医学上重要的药物。 1978年Itakura（板仓）等使人生长激素191肽在大肠杆菌中表达成功 1