《细胞工程实验》.docVIP

《细胞工程实验》 一、课程名称：细胞工程实验 Cell Engineering Experiment 二、实验课性质：独立设课 三、适用专业：生物技术 四、采用教材及参考书 司徒镇强，吴军正. 细胞培养. 西安：世界图书出版社，1996 李志勇. 细胞工程. 北京：科学出版社，2003 冯怀亮.哺乳动物胚胎工程. 长春：吉林科学技术出版社，1994 五、学时学分 课程总学时：36；课程总学分：1；实验课总学时：36 六、实验项目名称和学时分配 序号 实验项目名称 学时 分配 实验 属性 实验 类型 实验者类别 每组 人数 必开/选开 1 动物细胞培养液的配制及灭菌 4 基础类 验证性 本专科 1 必开 2 动物细胞的组织块培养法 4 基础类 验证性 本专科 1 必开 3 动物细胞的消化培养法 4 基础类 综合设计性 本专科 1 必开 4 动物细胞的传代培养 8 基础类 设计性 本专科 1 选开 5 细胞基本参数观察 4 基础类 验证性 本专科 1 选开 6 细胞的超低温冻存,复苏 4 基础类 综合设计性 本专科 1 选开 7 动物细胞的活性测定 4 基础类 综合设计性 本专科 1 选开 8 培养细胞的染色体标本制备与分带技术 4 基础类 验证性 本专科 1 选开 9 小鼠的免疫试验和用于融合细胞饲养层细胞的制备 4 基础类 综合设计性 本专科 1 必开 10 骨髓瘤细胞和免疫脾细胞的制备 4 基础类 综合性 本专科 1 选开 11 细胞融合 4 基础类 综合设计性 本专科 1 选开 12 杂交瘤细胞选择和克隆化培养 4 基础类 综合设计性 本专科 1 选开 13 血清制备或抗血清制备和抗体的检测试验 6 基础类 综合性 本专科 1 选开 14 单克隆抗体的制备与分离纯化 6 基础类 综合设计性 本专科 1 选开 15 小鼠超数排卵技术小鼠和胚胎移植 6 基础类 综合性 本专科 1 选开 16 小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）的培养及胚胎干细胞滋养层的制备 4 基础类 验证性 本专科 1 选开 17 小鼠胚胎干细胞（ES）的体外培养 8 基础类 综合性 本专科 1 选开 18 植物组织与细胞培养基的配制与灭菌 4 技术基础类 验证性 本专科 2 选开 19 外植体的消毒与愈伤组织诱导 4 技术基础类 验证性 本专科 2 选开 20 植物悬浮细胞系的建立 4 技术基础类 设计性 本专科 2 选开 21 原生质体的分离与培养 6 技术基础类 设计性 本专科 1 选开 22 细胞凋亡的诱导及生化检测 6 技术基础类 综合性 本专科 1 选开 23 流式细胞术分选血细胞试验动物 6 基础类 综合性 本专科 1 选开 24 动物细胞大规模培养技术 8 技术基础类 综合性 本专科 1 选开 25 植物细胞大规模培养技术 8 技术基础类 综合性 本专科 1 选开 七、实验教学的目的和要求 细胞工程是一门综合多种学科和技术的新兴学科，也是一门为多门学科提供实验依据的学科，与生物学、化学和工程学等基础学科紧密相关。既然是一门以实验学科为主的一门科学，其实验结果就显得尤其重要。实验的结果好坏，与实验的准备和实验的过程有关。在实验准备阶段，首先要做好计划，包括：做什么，怎样做，用什么做，实验程序是什么，关键程序是什么，这些都要做到心中有数，然后进行准备。在实验的实施阶段，就要根据计划所列的程序进行操作，尽管有一些变化，但变化以不会使计划乱套为准绳。 每一门科学有着科学发展的总规律，即从低级到高级逐渐发展的完善过程；每一门科学都有着自身发展的个性规律。对于细胞工程来这一实验为主的学科来说，其内容就由较低级的基础实验和由应用较高价值精密仪器进行的高级实验组成。也许有的同学瞧不起低级的实验，但请不要忘记这些实验是基础。没有这些基础实验的磨练，其科学素养难以塑造成功。有了基础，有了科学素养，再进行其他实验也就相对自由了，自如了。 目的：学习动物细胞培养技术、动物细胞培养技术、杂交瘤技术与单克隆抗体制备、哺乳动物早期胚胎细胞和干细胞的活体观察与体外培养技术，以及细胞工程相关综合技术。锻炼学生的动手验证能力，开拓学生的思维能力，培养学生的科学素养，使自己具备能够进行独立设计、实施和完成科学实验的能力。 要求：学生应按照先简后繁、先易后难的顺序进行实验操作。 掌握实验室和工程化生产的技术要点，掌握动物细胞培养技术、动物细胞培养技术、杂交瘤技术与单克隆抗体制备技术和小鼠胚胎工程技术，了解哺乳动物早期胚胎细胞和干细胞的活体观察与体外培养技术，以及细胞工程相关技术。 八、实验项目的内容和要求 1．动物细胞培养液的配制及过滤除菌 实验内容： 1.1、动物细胞培养液的配制 PBS，DMEM，1640，TCM，MEM