细胞生物学 03 细胞生物学研究技巧方法.pptVIP

;;显微镜技术;显微镜技术 光学显微镜技术 电子显微镜技术 SEM（scanning electron microscope） TEM（transmition electron microscope） 扫描隧道显微镜;（1）普通复式光学显微镜性能参数 分辨率：区分开两点间的最小距离 R=0.61λ/nsin(α/2) NA=nsin(α/2) NA(numerical aperture)为物镜的数值孔径值 影响分辨率的因素 入射光的波长 镜口角 介质的折射率 ;（2）普通复式光学显微镜特点和局限性 特点：明视场显微镜是以标本的颜色及其透射率为基础的显微镜。 一般需要对处理过的样品（固定染色）进行观察 以可见光为光源（波长范围400nm-700nm） 局限性 难以观察活的样品 分辨能力有限 能不能用光学显微镜观察活细胞呢？;2、活细胞观察技术 相差显微镜 微分干涉显微镜 录像增差显微镜 倒置显微镜;（1）活细胞观察技术—相差显微镜 原理：把透过标本的可见光的光程差（相位差）变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。 特殊构造：相差物镜、环形光阑、合轴调中望远镜、绿色滤光片 ;;相差显微镜的应用 特点：可以对无色透明的标本进行观察。适合于观察未经染色的活细胞。;（2）活细胞观察