哈茨木霉H13形态及生理特征的研究.pdfVIP

摘要 木霉菌是一种广泛存在于土壤、植物根际和叶面的腐生型真菌，对多种植 物病原真菌具有拮抗作用。因而被当作一种生防菌种进行使用，并引起了众多微 生物学家和植物病害研究者的高度重视。 本项研究采用对比研究法，与对照菌株相比，将试验菌株培养后，从菌落， 菌丝体，细胞形态等宏观层次阐明主要差异；从菌物对环境物质吸收、转运及利 用，阐明对环境物质选择性吸收的可调控性；从对目的物合成种类与星的分析， 阐明相关酶基因表达能力与效果变化规律；为生产实践提供技术参数。 文中采用将试验菌株与原菌株分别点接在PDA培养基平板上，30℃下培养 3天，肉眼观察菌物呈圆斑状，菌斑上的菌丝大部分呈白色，菌斑的局部有色素 合成，呈现淡黄色。在液体培养基中，木霉菌丝相互缠绕在～起，呈球状，显淡 黄色。普通光学显微镜观察表明，木霉菌丝纵横交错，呈网络状。扫描电镜观察 表明，对照菌株孢子基本呈圆形，表面粗糙，中间略有凹陷，试验菌株孢子表面 光滑，棱角清晰，呈馒头状，有的甚至呈方形，中问略有凹陷。 通过对发酵液残留糖含量的测定，试验菌株培养液中还原糖的浓度明显低于 对照菌株，说明试验菌株对碳源的吸收利用速率明显要高于对照菌株。 在进行产几丁质酶和纤维素酶的试验中，分别以胶态几丁质和羧甲基纤维素 钠作为相应的产酶培养基中的唯一碳源，通过测定几丁质酶的酶活以及纤维索酶 水解圈的大小，得出离子束诱变后，试验菌株的产酶基因的表达比对照菌株有了 较大的增强，试验菌株几丁质酶的酶活最高可达0．292U／ml，而对照菌株酶活只 有0．228 U／m1故产几丁质酶最佳培养基是在原培养基中添加1．O％的酵母粉：纤 维素酶也是木霉抑菌的又一酶制剂，文中采用羧甲基纤维素钠(CMC)作为唯一碳 源的产纤维素酶培养基，以CMC水解圈的大小来衡量纤维素酶的酶活，则试验菌 株的水解圈的直径偏高于对照菌株。 通过上述试验表明，离子束对木霉的生物学特性改造产生积极影响，经20 代转接，木霉的遗传稳定性未见明显衰退，提高了木霉对环境物质吸收转化利用 的选择性；发现几丁质酶、纤维素酶量与活性均有定向提高。一 总结上述，，离子柬诱变在生防菌株木霉的改良上起着重大的作用，改良后 的菌株对外界环境的适应性比对照菌株提高，遗传性状较对照菌株稳定，试验菌 株对酸碱、高温及渗透压的耐受性增强，所有这些特点表明改造后的菌株更适合 用作生防菌株。 关键词：木霉，几丁质酶，纤维素酶，试验菌株，对照菌株 Abstract in andleafsurface Tfichodermawhichexiststhe rootzone widespread soil．plant a isart of a： is rot andit bacterium typicalfungi antagonistic Agaricussp as 1,wnandattractsmuchattention ．SoTrichoderma妇 usedbiocontrofactors and1eaiTlerson diseases． ofmanymierobiologists plant was use the methodmadeofinthis Contrasting experiment．Afterculturing mutant were andeell strain。maindifferencesconcluded