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动物实验基本训练病理生理学阎春玲人体机能学实验室 一、目的要求 了解病理生理学实验课的特点 掌握实验的基础知识和基本技能 掌握各种实验器械的使用方法 二、注意事项 1. 遵守实验室守则，不准迟到早退，不准大声喧哗 2. 穿隔离衣，不准穿拖鞋 3. 分组实验，选出小组长 4. 实验结束后处死动物，打扫卫生 （一）实验动物的抓取固定方法 1. 小鼠抓取固定方法 2. 大鼠抓取固定方法 3. 豚鼠抓取固定方法 4. 蛙类抓取固定方法 5. 兔的抓取固定方法 三、基本技能 （三） 实验动物被毛的去除方法 剪毛：固定动物后，用粗剪刀剪去所需部位的被毛。 脱毛：脱毛系指用化学药品脱去动物的被毛，适用于无菌手术野的准备以及观察动物局部皮肤血液循环和病理变化。 拔毛：兔耳缘静脉注射或取血时以及给大、小白鼠作尾静脉注射时，需用拇指、食指将局部被毛拔去，以利操作。 （四） 实验动物给药途径和方法 1. 皮下注射 2. 皮内注射 3. 肌肉注射 4. 腹腔注射 5. 静脉注射 6. 经口给药 7. 其它途径： 皮肤、脑内、直肠内、关节腔内 　 （五）实验动物的麻醉 1. 常用的麻醉剂 　 ①挥发性麻醉剂 ②非挥发性麻醉剂：20%氨基甲酸乙酯（乌拉坦） ③中药麻醉剂。? 2. 动物的麻醉方法 　 ① 全身麻醉 　　（1）吸入法 （2）腹腔和静脉给药麻醉法 ② 局部麻醉 ③ 麻醉注意事项 （1）静脉注射必须缓慢 （2）麻醉时需注意保温 兔采血法 　 1、耳静脉采血 2、心脏取血 3、颈动-静脉取血 　 4、股动-静脉取血 （六）实验动物采血方法 （七）急性动物实验常用的手术方法 急性动物实验中常以血压、心率、呼吸等为指标，以静脉注射、放血等为实验方法。 1. 肌肉、神经和血管的分离 （1） 肌肉组织: 顺肌纤维方向作钝性分离。肌肉组织内含有小血管，若需切断，应事先用止血钳作双重钳夹，结扎后才可剪断。 （2） 神经和血管: 玻璃分针顺着血管或神经走向分。分离手术完成后用浸有温热生理盐水纱布盖在切口上。 （七）急性动物实验常用手术方法 2. 颈部手术与插管 将实验动物麻醉，仰卧固定，剪去颈部的毛；用手术刀沿颈部正中线在甲状软骨与胸骨之间作一切口（ 5~7 厘米） （1）气管插管术 将左右胸骨舌骨肌向两侧拉开，穿棉线备用。在甲状软骨下 0.5~1cm 将气管横向剪开；再向头端作一小纵切口，呈倒“ T ”形；将气管套管向心端插入气管腔内，结扎并将结扎线固定于“ Y ”形气管插管分叉处。 （七）急性动物实验常用手术方法 （2）颈总动脉插管术 测量动脉血压或放血。呈红色较大的血管，手触之有搏动感。沿血管走行方向分离出颈总动脉，长约1.5~2.0 cm ，在其下穿两根丝线备用。在颈总动脉的远心端结扎，近心端用动脉夹夹住动脉，用眼科剪将动脉剪一与血管呈 45 ℃角的向心切口，将动脉套管由切口向心脏方向插入动脉内，结扎、打结固定、打开动脉夹。 （七）急性动物实验常用手术方法 分离颈总动脉 （3）颈浅静脉插管术 用于注射、取血、输液及中心静脉压测量。 颈浅静脉位置浅，位于颈部皮下。颈部正中切口，在胸锁乳突肌外缘即可见呈暗紫色的粗大血管—颈浅静脉。用止血钳沿血管走向将静脉周围的组织轻轻钝性分离，穿两根细丝线备用。将导管或静脉套管插入（与颈总动脉相似）。如测量中心静脉压，插入导管 5cm ，此时导管口在上腔静脉近右心房入口处。 （七）急性动物实验常用手术方法 （八）实验动物的处死方法 1. 蛙类 金属探针插入枕骨大孔，破坏脑脊椎。 2. 大鼠和小鼠 　　①脊椎脱臼法；②断头法； 　 ③急性大失血法；④化学致死法。 3. 狗、猫、兔、豚鼠 　 ①空气栓塞法；②急性失血法； 　 ③破坏延脑法；④开放性气胸法； 　 ⑤化学药物致死法。 （一）常用的手术器械及使用方法 1. 手术刀 较大切口可采用拇指与中指、无名指夹住刀柄两侧，食指压于刀背上； 小