壬基酚和β萘黄酮对河川沙塘鳢（Odontobulis potamophila）幼鱼雌激素抗雌激素效应的研究.pdfVIP

摘要 中文摘要 近年来，环境内分泌干扰物质(EDCs)对人类和野生生物的危害越来越受到人 们的关注。这些物质通过模拟或拮抗下扰生物体内源激素的形成或功能，由此影响 生物体生长、发育、繁衍等生命活动。目前，关于单一环境内分泌干物对鱼的影响 的研究已相当深入，但多数是对成鱼阶段的研究，对幼鱼阶段的研究相对较少。野 外自然环境是个复杂的，多元化的，往往存在多种EDCs共同作用，其原理和结果有 时与单一物质作用时人不相同。本文以壬基酚(4．nonylphenol，NP)和p一萘黄酮 和抗雌激素效应的影响，主要包括以下两部分，探索NP长期暴露对河川沙塘鳢性腺 壬基酚和p．萘黄酮联合作用下的雌激素／抗雌激素效应，以及对7．乙氧基．3．异吩嗯唑 酮．脱乙基酶(EROD)和谷胱甘肽转移酶(GST)等牛物转化系统酶的影响。为进 一步了解环境内分泌T．扰物对幼龟生态毒理影响研究提供基础资料。 VTG已被公认为检测鱼类和其他卵生脊椎动物受环境雌激素影响的生物标志 幼鱼卵黄蛋白原诱导的情况。把孵化出的河川沙塘鳢仔鱼暴露于3个浓度(100pg／L、 川沙塘鳢幼鱼肝脏VTG基凶的表达，并合成VTG蛋白；血液中VTG蛋白的含量以及 肝脏VTGmRNA的表达量随着NP浓度的增加而递增，具有明显的浓度效应；当NP达 及基凶表达水平可以作为环境雌激素监测的有效终点指标。 本章利用组织学方法研究了环境雌激素化合物壬基酚对河川沙塘鳢性腺分化和 发育的影响。把人工孵化的河川沙塘鳢仔鱼暴露于3个浓度(100、300和500耀／L) 的工基酚中，同时设空白对照和溶剂对照，暴露时间为150d，显微观察性腺组织。 试验结果显示，河川沙塘鳢性腺分化的过程足由中性的性腺直接分化出卵巢或精巢。 暴露于500ug／LNP以下的各处理组中的河川沙塘鳢性别比例约为l：l，与对照组没有 摘要 暴露组中分别占样本总数的20％和22％：此外，NP对精巢组织结构产生一定的毒害， 精巢中出现了坏夕E细胞和纤维化现象。 臼原诱导的影响 利用ELISA和real．timeRT-PCR来研究NP和类多环芳烃化合物一BNF联合暴露 对河川沙塘鳢幼鱼VTG的诱导情况。把河川沙塘鳢幼鱼分别暴露在(NPl001ag／L， 200腭几，300I_tg／L：NP200腭几+卧F30pg／L，NP2001．tg／L+13NF60Ftg／L，NP200pg／L 组)的36％、40％和35％，差异极显著(P0．001)；这种抑制效应也体现在转录水平 上，刚F也抑制VTGmRNA的表达量，表现为较强的抗雌激素效应。 4壬基酚和p．萘黄酮对河川沙塘鳢(Odontobulispotamophil)幼鱼生物转化酶系统 的影响 生物转化系统的影响。把河川沙塘鳢幼鱼分别暴露在(NPl00pg／L，200pg／L， 28d后取样进行检测。试验结果显示：首先，NP单独暴露时可以抑$I]EROD酶的活 30la 60u 性；当J3NF单独暴露时，IBNFg／L和JBNFg／L暴露组的活性升高，f且是与对 照没有明显的差异，郦NFl20pg／L的活性却下降，有可能由于浓度太高导致酶的 活性诱导机制欠活。当pNF与NP联合暴露，活性恢复到对照的水平，但是与 NP200．g／L相比，其活性迅速升高。最后，NP和刚F单独暴露时可以降低GST酶的 活性，而刚F与NP联合暴露后，酶的活性恢复到对照的水平，与对照相比没有显 著的差异。无论是单独暴露还是联合暴露GST的酶活性均没有升高，这说明了在第 1I相代谢过程中除了GST参与此阶段的反应，还有其他的酶参与此反应，如尿苷二 磷酸葡萄糖酸转移酶(UDP．GT)。 关键词壬基酚；p一萘黄酮：河川沙塘鳢；性别分化；性腺发育；卵黄蛋白原；7- 乙氧基．3．异吩嗯唑酮．脱乙基酶(EROD)；谷胱甘肽硫转移酶(GST)。 2 AbsUact Abstract endocrine an serious