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第3章 天然有机化合物提取技术
第3章 天然有机化合物提取技术 第一节 提取的原则及提取的基本步骤 提取(extraction):是利用一种溶剂(单一溶剂)或几种不同溶剂(混合溶剂)对不同物质溶解度的差异,从混合物中分离出一种或几种组分的过程。所以,提取又称抽提或萃取,它们三者的英文名都是Extraction,其含义基本相同。 提取是分离纯化的前期操作,先将经过处理或破碎的组织,置于一定条件下的溶剂中(可用缓冲溶液或稀酸、稀碱、有机溶剂等),让被提取的有机物质从生物细胞内充分释放出来。如果被提取物质在细胞内呈固相或与固体结合存在,提取时由固相转入液相,常称为固—液萃取。如果被提取物质在细胞内原已呈液相存在,提取时由一液相转入另一互不相溶的液相,这种方法称为液—液萃取或称为抽提。 习惯上提取多指分离纯化前期被提物从破碎的细胞中释放出来的过程,抽提则贯穿在分离纯化整个过程中。如核酸制备过程中,用氯仿或苯酚反复振荡抽提除去蛋白质;分离DNA和RNA,用乙酸乙酯从醇提取液抽提一些脂溶性脂质等。 所以,提取应是分离纯化工作的开始,它的效果如何?主要取决于被提物在溶剂中的溶解度大小,由固相扩散到液相的难易,同时选择提取条件对制备物稳定性的影响,是否利于以后的分离纯化等因素均应考虑。 一、提取的原则及提取的基本步骤 二、标准提取物和比例提取物 第二节 提取方法 ②亲水性有机溶剂 亲水性有机溶剂是能与水互溶的有机溶剂,常用的有乙醇、丙酮等。 乙醇:极性仅次于水,为常用溶剂。乙醇是一种半极性溶剂,其溶解性能界于极性与非极性溶剂之间,既能溶解水中溶解的成分,也能溶解非极性溶剂所溶解的成分,只是溶解度有所不同。同时,乙醇对植物细胞的穿透能力较强。亲水性的成分除蛋白质、粘液质、果胶、淀粉和大部分多糖外,大多能溶于乙醇。难溶于水的亲脂性成分如色素、单宁、树脂、内酯、脂肪油等,在乙醇中的溶解度也较大。 乙醇有防腐作用,含量达20%以上时,即能使被提取原料不至变质,含量达40%时,能延缓许多物质的水解作用而增加其稳定性。乙醇作为有机溶剂,易燃烧,但毒性小,价格便宜,来源方便,有一定的设备即可回收反复使用。 丙酮:是一种良好的脱脂溶剂,由于能与水互溶,所以也是一种脱水剂,常用于脏器的脱脂、脱水。丙酮也有防腐作用,但丙酮易挥发和燃烧,且有一定毒性。丙酮常用于植物中脂溶性物质的提取和分离 ③亲脂性有机溶剂 亲脂性有机溶剂是不能与水互溶的有机溶剂,如石油醚、氯仿、乙醚、乙酸乙酯等。这些溶剂的选择性强,不能或不易提出亲水性杂质。这类溶剂的挥发性大,易燃烧,一般有毒,价格较贵,设备要求较高,且透入植物组织的能力较弱,往往需要长时间的反复提取才能提取完全。 乙醚:是一种非极性溶剂,与乙醇及其它非极性溶剂能互溶。大部分能溶于水的成分在乙醚中均不溶解。乙醚能溶解脂肪、挥发油、树脂、油树脂、蜡质以及游离生物碱等。 氯仿:是非极性溶剂,不易燃烧,与乙醇及乙醚等互溶。游离生物碱、苷、脂肪油、挥发油、树脂、油树脂等能溶于它。碱化了的植物组织的氯仿浸出液含较多较纯净的生物碱或皂苷。 (5)提取操作方法 溶剂提取的具体操作方法有许多种。各有其特点和适用性。要根据生物原料的特性、生产需要等方面来决定选用何种方法。 a. 浸渍法 这是一种常用的、比较简单的溶剂提取方法。先将植物原料粉碎,装入容器中,加入适量的溶剂,以漫没原料稍过量为度,不断振摇或搅拌,放置一天以上再过滤,残渣外加新溶剂,如此反复提取2~3次。第二次、第三次浸清时间可以适当短些。最后,合并提取液,浓缩至适宜浓度(若为有机溶剂应考虑溶剂回收)。 浸渍法可分为:温浸和冷浸两种。 冷浸:适用于提取成分遇热易被破坏及含淀粉、树胶、果胶、粘液质的样品。 温浸:由于增大了提取成分的溶解度,故浸提的效果比冷浸好一些。 浸渍法操作简单也较为经济,但是提取时间长,效率不高,尤其是以水作溶剂时。在夏季,提取液易发霉变质,必要时要加适量的防腐剂。 b. 渗漉法 用适当溶剂将原料粗粉湿润膨胀后,装入渗漉筒中,然后不断加入新溶剂,浸出液自渗漉筒下端流出,可以连续收集浸提液。
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