细胞化学染色检验幻灯片课件.pptVIP

实验九：细胞化学染色检验（一）一、过氧化物酶染色（POX) 1. 目的: 了解过氧化物酶染色的原理、方法、注意事项和临床意义。 2. 原理: （四甲基联苯胺法） 粒细胞和部分单核细胞的溶酶体颗粒中含有过氧化物酶(peroxidase, POX)，POX能将底物四甲基联苯胺(tetramethylbenzidine,TMB)氢离子传递给H2O2，使之氧化为四甲基联苯胺蓝。四甲基联苯胺蓝又可与亚硝基铁氰化钠结合，再进一步氧化形成稳定的蓝色颗粒，定位于细胞质酶所在部位。若无亚硝基铁氰化钠，四甲基联苯胺蓝则自我脱氢氧化成棕色的四甲基苯醌二胺沉着于酶所在部位。 实验九：细胞化学染色检验（一）一、过氧化物酶染色（POX) 3. 方法步骤 1) 取0.1％TMB乙醇溶液1ml，加亚硝基铁氰化钠饱和溶液10μl，溶液呈淡棕黄色。染色液应在临用前配制。 2) 在新鲜干燥的涂片上，加0.1％TMB-亚硝基铁氰化钠饱和溶液的混合试剂0.5ml，放置1min后，再加稀过氧化氢溶液0.7ml，吹匀，染色6min。 3) 直接用流水冲洗，待干，再用瑞氏染液复染15～20min。 4) 流水冲洗后，待干，用油镜镜检。 5) 结果判断 在细胞质中出现蓝色或蓝黑色颗粒为阳性反应。 阴 性：无颗粒。 　　 弱阳性：颗粒小