虎纹捕鸟蛛毒素的基因克隆、表达及功能研究.pdfVIP

中文摘要中又捅要 西省的一种毒蜘蛛。它的毒液是由许多生物活性成份组成的复杂混 合物，通过蛋白质组学和多肽组学方法从粗毒中已经鉴定了90种蛋 白质和47种多肽，但这仅仅为粗毒中的部分高丰度组份。为了克隆 虎纹捕鸟蛛毒腺中编码多肽和蛋白质的基因，我们使用表达序列标 签(EST)技术，构建了毒腺的定向全长eDNA文库。随机测序后获 得468个EST，通过聚类分析，可分成69个族：24个族是重叠群(每 个群包括2个EST以上)和65个族是单态(每个族只包括1个EST)。 通过生物信息学分析，其中68％的EST属于的毒素转录子；13％的EST 属于细胞转录子；19％的EST属于新的转录子。所有毒素转录子编码 67个开放读码框(ORF)，即67个前体肽。根据前体肽序列的差异， 超家族、HWTX—I I 超家族、HWTX—XVI超家族、HWTX-XVII超家族和HWTX—XVII超家族。 67个前体肽能被推导出43个成熟肽，序列中含半胱氨酸残基丰富， 因此命名为半胱氨酸结毒素(CKT)，其中31个是新的成熟肽。非毒 素转录子编码41个蛋白质，它们是细胞蛋白质或别的非CKT分子， 用真核生物正向同源群