真菌感染实验诊断讲义幻灯.pptVIP

真菌感染实验诊断;一、真菌的形态特性;菌丝和孢子的形态因菌而异,是鉴定 真菌的重要依据。孢子又分为多种, 如叶状孢子、分生孢子和孢子囊孢子 等。 ; 二、真菌菌落特性;第二节 标本采集及检验程序;2．各种分泌物和排泄物:生殖道 分泌物、耳垢、痰、粪便、尿 液等。 ;3．血液和体液:体液包括胸水、 腹水、脑脊液、淋巴穿刺液等。 4．脓汁及渗出物。 ;(二)采集标本注意事项;2．在用药前采集标本 一般真菌 标本须在用药前采集,对已用 药者则需停药一段时间后再采 集标本。;3．采集的标本量要足 血液和脑 脊液标本5ml,胸腔液20ml, 皮屑标本两块,活体组织两份 (一份送病理科检查,一份作 镜检和培养)。 ;4．严格无菌操作 并进行消毒处理, 尤其是采集血液和脑脊液标本, 要避免污染杂菌。 5．采集标本立即送检 深部真菌标 本最长不得超过2h。 ;第三节 真菌检验;直接镜检的意义;③判断某些真菌种的致病性等,如 皮肤癣菌、曲霉等。;直接镜检也有局限性: ①阴性结果不能排除真菌感染; ②有假阳性结果。 因此,对直接镜检可疑结果应 作复查或用其他检验方法鉴定。 ;(二)抗原检测; 用胶乳凝集试验检测标本中的白 假丝酵母菌甘露聚糖抗原。 用胶乳凝集试验和ELISA检测血 清和脑脊液中的隐球菌多糖荚膜抗 原,在治疗前检测非常敏感特异。; 用半定量放射免疫法检测血清、 尿液和脑脊液中荚膜组织胞浆菌循 环多糖抗原,可快速诊断。 ;二、真菌的分离培养;①菌落性质:酵母菌还是霉菌; ②菌落大小,病原性真菌菌落小, 而条件致病性真菌菌落大;;③菌落颜色 病原性真菌颜色淡, 污染真菌颜色深; ④致病性真菌菌落下沉,有时使 培养基开裂;污染性真菌菌落 不下沉,很少引起开裂。 ;三、真菌的生化反应;2.同化碳源试验 含菌生理盐水 与已融化的固体同化碳源培养 基(45℃)混合,然后在培养基 上分别加糖,置25℃孵育观察 结果。若24h后无变化可重复 加糖。如能同化周围有生长圈, 否则无生长。 ;3.同化氮源试验 同化碳源试 验相同,但需用无氮源的培 养基,不要加糖类,而加入 硝酸??。 ;四、动物实验;五、核酸检测 ;(一)G+Cmol％分类鉴定法;(二)真菌核型的脉冲电泳分析;原理:PFGE有两个方向的电场在设 定的脉冲时间里交替变换,使大分 子DNA在移动中不断改变自己的形状 及迁移方向,从而绕过细小的凝胶 孔隙而得以分离。较大的DNA分子泳 动慢些,较小的快些,有许多因素影 响电泳带型,分离真菌等大分子量的 DNA宜用较低电压和较长脉冲时间。;用PFGE分析真菌核型,可直接比较 其遗传背景,从电泳核型差异中进行 分类鉴定,又能取得基因结构的基本 数据,构建出大尺度物理图谱。 ;(三)随机扩增多态性 DNA(RAPD)分析;六、真菌毒素的检测;检测真菌毒素有许多方法,如检测 黄曲霉毒素有生物学方法和ELISA法 等。生物学方法主要用于检测真菌 毒素的毒性,如用鸡胚、小白鼠作 毒性试验,观察动物中毒死亡或出 现肿瘤。ELISA法操作简便,并具有 安全快速高效、费用低,适用于大 批量标本的筛选。 ;　现今医学分为传统医学、基于“生物-医学模式”近代发展起来的西医，20世纪西医又发展到“社会-心理-生物医学”或综合医学模式，后基因组时代系统生物学的兴起，形成了系统医学在全球的迅速发展，成为继传统医学、西医学之后中、西医学汇通的未来医学。当代中国医学类专业比较优秀的学校有北京大学、华中科技大学、郑州大学等学校。 　　中医即中国传统医药学，是　现今医学分为传统医学、基于“生物-医学模式”近代发展起来的西医，20世纪西医又发展到“社会-心理-生物医学” （高血压心脏病糖尿病）或综合医学模式，后基因组时代系统生物学的兴起，（传染病丙肝乙肝甲肝）形成了系统医学在全球的迅速发展，成为继传统医学、西医学之后中、西医学汇通的未来医学。当代中国医学类专业比较优秀的学校有北京大学、（肿瘤癌症胃癌肠癌肺癌） 华中科技大学、郑州大学等学校。 （肺血液血小板红血球白血球） 　　中医即中国传统医药学，是形成于数千年前的中国，是建立在人们与疾病长期斗争的经验总结及阴阳五行、八纲脏腑辨证基础上，运用朴素辩证法及思辨推理方法，认识机体、自然、疾病三者关系，发展起来的（传染病丙肝乙肝甲肝）一门以“功能人”包括功能脏器为概念的独特的医学哲学理论体系。（肺炎青霉素肝炎） 在治疗上，除了药物外，还有针灸、推拿气功、（高血压心脏病糖尿病）耳针等特殊疗法，它是世界传统医学中最完善的