Ephrin-B3沉默对大鼠脊髓损伤后功能修复及Gap-43表达的影响.pdfVIP

Ephrin-B3沉默对大鼠脊髓损伤后功能修复及Gap-43表达的影响 杜鹏 吕刚智晓东 辽宁医学院附属第一医院骨科，辽宁锦州121001 目的 观察Ephrin-B3基因沉默后对脊髓损伤(SCI)功能恢复的影响。方法 构建3组针对Ephrin-B3基因的siRNA干 扰质粒（用于实验组：A、B、C组）及1组乱序siRNA干扰质粒（用于对照组D组）,体外克隆并提取质粒后包装慢病毒颗粒。半横 切法制作成年大鼠SCI模型，将病毒颗粒注入SCI处。分别在注入1、2、4、8周后，采用BBB评分法比较大鼠肢体功能恢复情 况；采用Real-time PCR法检测伤后各组脊髓组织Ephrin-B3 mRNA表达情况；采用免疫组化法观察脊髓组织Gap-43的表达变 化。结果 Ephrin-B3 mRNA在正常大鼠脊髓内呈相对低表达，D组表达水平呈上升趋势，实验组大鼠出现Ephrin-B3沉默效 果，B组尤为明显。转染后1-4周，B组大鼠BBB评分呈持续升高趋势，高于其他3组,D组明显低于实验组，4周时各组恢复效 果都进入平台期。免疫组化结果显示,B组脊髓组织内Gap-43表达最明显，从转染后1周开始升高，4-8周时有所下降，而D组 呈持续性弱表达。结论 沉默Ephrin-B3能够促进大鼠SCI早期功能修复并上调脊髓组织内Gap-43的表达。 脊髓损伤；大鼠；功能修复；Ephrin-B3; Gap-43 R651.2 A 0258-4646( 2012)04-0307-04 Effects of Silence Ephrin-B3 on Functional Recovery and Expression of Growth Associated Protein-43 after the Spinal Cord Injury in Rats DU PengL(U) GangZHI Xiao-dong 辽宁省教育厅科学技术研究创新团队项目（LT2010062） 杜鹏（1983 -），男，医师，硕士. 2011-12-05 有统计学意义。 , Ephrin-B3 mRNA的表达量为对照组D组的65％， @@[1 ] Du J,Fu C,Sretavan DW. Eph/Ephrin signaling as a potential thera peutic target after central nervous system injury[ J ]. Curt Pharm Des, 2007,13(24 ) : 2507-2518. @@[2]陈向荣，游思维，金大地.BBB评分评估脊髓损伤大鼠后肢运动 功能的探讨[J].中国脊柱脊髓杂志，2004,14(9):547-548. @@[3]赵玉斌，张积仁.乳腺癌EphA2，EphrinAl；ERa，ERp和PR的表 达及RNAi沉默EphA2基因的实验研究[D].南方医科大学， 2010. @@[ 4 ] Shao Z, Browning JL, Lee X,et al. TAJ/TROY, an orphan TNF recep tor family member,binds Nogo-66 receptorl and regulates axonal re generation [ J ]. Neuron, 2005,45 ( 3 ) : 353-359. @@[5] Benson MD,RomeroMI,Lush ME,et al. Ephrin-B3 is a myelin based inhibitor of neurite out-growth [J]. PNAS,2005,102(30): 10694-10699. @@[6]肖琴，陈娟，吴艳秋.脑室周围白质软化新生大鼠脑组织ephrin- b3表达及神经细胞凋亡[J].中国当代儿科学杂志，2007,9(4): 321-323. @@[7] Yiu G,He Z. Signalingmechanisms of themyelin inhibitors ofax-on regeneration[ J ]. Curr Opin Neurobio J, 2003,13 (5) : 545-551. @@[8] Yokoyama N,Romero MI ,C, owan CA,et al. Forward signali