基因诊断在临床应用现状调查.doc

基因诊断在临床应用现状调查 王鹏辉 3091502076 检验0903 【摘要】基因诊断又称DNA诊断，是70年代末迅速发展起来的一项应用技术，目前已广泛应用于临床许多疾病的诊断，包括遗传性疾病的基因诊断、肿瘤的基因诊断、感染性疾病的基因诊断、法医学鉴定中的基因诊断、疾病易感性的基因诊断、药物筛选和药物开发的基因诊断等，本文对基因诊断在临床的应用及其应用过程中存在的问题进行综述。 【关键词】基因诊断；遗传性疾病；肿瘤 基因诊断又称DNA诊断或分子诊断，通过对患者体内提取样本用基因检测方法直接检测基因结构及表达水平的改变，检测病原体基因型，进而判断患者是否有基因异常或携带病原微生物。与其他诊断方法相比，基因诊断具有突出的优点：一是能从基因水平彻底揭示疾病病因及发病机理；二是可进行症状前诊断，能显著提早产前诊断的时间；三是取材少，来源广，微量标本即可进行诊断；四是可快速检测不易在体外培养（如艾滋病病毒、各种肝炎病毒等）和不能再实验室安全培养的病原体。因此，基因诊断迅速在临床诊断领域特别在遗传病研究领域得到了较为广泛的应用。 1.基因诊断在临床的应用 1.1遗传性疾病的基因诊断：目前已发现的人类遗传性疾病达数千种之多，分为单基因缺陷造成的遗传病（包括显性遗传、隐性遗传、X-染色体连锁遗传病等）、多基因缺陷导致的复杂因素遗传病以及染色体数目异常的遗传病。随着对多种遗传病致病基因和突变类型以及许多可用于基因连锁分析的遗传标志的澄清，再加上基因诊断方法学的不断改进和更新，使得基因诊断被广泛地应用于遗传病的诊断中。目前遗传病基因诊断所取得的成绩最为显著和突出。地中海贫血是一种常见的严重危害的遗传性血液病。Drobyshev等用10聚体的寡核苷酸微集芯片，成功检测β-地中海贫血患者红细胞中β-珠蛋白基因中的3个突变位点[1]。血友病B是凝血因子Ⅸ基因缺陷引起的一种X染色体连锁隐性遗传病，关节腔和肌肉出血是严重病例的特征性表现。目前只能对下列遗传病进行基因诊断：已知特定基因位点突变或缺失的单基因病；已知与特定突变基因突变处于连锁不平衡的DNA标记RFLP；检查癌细胞染色体重排；新生儿死亡一击基因已被克隆的或有DNA连锁标记的遗传性酶病[2]。 1.2肿瘤的基因诊断：肿瘤的形成是遗传因素与环境因素相互作用的结果。癌基因、抑癌基因及其产物作为肿瘤标志物在肿瘤诊断，检测肿瘤复发与转移，判断疗效和预后以及人群普查等方面都有较大的实用价值。通过检测癌基因、抑癌基因中发生的基因突变有助于肿瘤的早期诊断。抑癌基因p53是人类肿瘤中最常见的突变基因，约50%以上的肿瘤都存在该基因的突变，通过将p53基因外显子2-11区域内所有突变位点的突变探针以及对应的正常序列探针集成在一块芯片上，制成p53基因芯片，为肿瘤的早期诊断、分类提供一条新途径。SPLUNCL蛋白、p16基因、p27基因等可以作为鼻咽癌的诊断标志物，用于鼻咽癌的早期诊断[3]。 1.3感染性疾病的基因诊断：采用形态学、生物化学货血清学诊断细菌、病毒、寄生虫和真菌等感染性疾病，有时存在灵敏度低、特异性差及速度慢等不足之处，基因诊断技术可以克服这些不足，它既能检出正在生长的病原体，也能检出潜伏的病原体；既能确定既往感染，也能确定现行感染。 1.4法医学鉴定中的基因诊断：主要是针对人类DNA遗传差异进行个体识别和亲子鉴定。其中最常用的基因诊断技术是DNA指纹技术、扩增片段长度多态性分析技术以及检测基因组中短串联重复序列遗传特征的PCR-STR技术和检测线粒体DNA的PCR-mtDNA技术。 疾病易感性的基因诊断：基因诊断在判断个体对某种重大疾病的易感性方面起着重要作用。如人类白细胞抗原复合体的多态性与一些疾病的遗传易感性有关。 1.5器官移植组织配型中的基因诊断：器官移植的主要难题时如何解决机体对移植物的排斥反应。基因诊断技术能够分析和显示基因型，更好地完成组织配型，从而有利于提高器官移植的成功率[4]。 1.6药物筛选和药物开发中的基因诊断：由于芯片技术具有高通量、规模、行性等特点，可以进行新药的筛选，尤其在对中药成分的真伪鉴定及有效成分的筛选、理学研究、化学药物的合成等方面具有重要的药化作用。且用基因芯片作大规模的筛选研究可以省略大量的动物实验，缩短药物筛选所用时间。 1.7胚胎植入前遗传学诊断（PGD）：GPD是体外获取卵子或植入前胚胎，经极体或卵裂球活检，检测胚胎的染色体和基因，将无病胚胎植入母体子宫，以获取正常子代的技术，是一项实现诊断时机前移、避免选择性流产、可应用于不育患者并能达到源头阻断遗传病传递的积极优生技术。目前在我国，该项目开展十分有限，总体处于起步阶段。使用到的技术包括单个卵裂球荧光原位杂交、多色/多重FISH等基于单细胞的染色体分析技术；单细胞巢式/多重巢式PCR等