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基因工程的基本操作程序学案及答案-新课标人教版选修3
高二年级选修班生物导学提纲选修3(二)
专题1 基因工程
1.2 基因工程的基本操作程序
班级:____________学号:__________姓名:_____________
执笔人:侍东升 审核人:刘德海 核对人:朱春霞
[教学目标]
1、简述基因工程原理及基本操作程序。
2、尝试设计某一转基因生物的研制过程。
[教学重点和难点]
1、教学重点
基因工程基本操作程序的四个步骤。
2、教学难点
(1)从基因文库中获取目的基因。
(2)利用PCR技术扩增目的基因。
[教学过程]
A 自主学习
一、目的基因的获取:
1.目的基因:符合人们需要的,编码蛋白质的 。
2.获取目的基因的方法
(1)从基因文库中获取目的基因
①基因文库:将含有某种生物不同基因的许多 ,导人受体菌的群体中 ,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。
基因组文库:含有一种生物的 基因
②种类
cDNA文库:含有一种生物的 基因
③目的基因的获取
根据基因的有关信息:基因的 序列、基因在 上的位置、基因的 产物mRNA、基因的 产物蛋白质等特性获取目的基因。
(2)利用PCR技术扩增目的基因。
①PCR:是一项在生物体外 特定DNA片段的核酸合成技术。
②条件:已知目的基因的 序列。
③过程:目的基因DNA受热形成 ,与 结合,然后在_________的作用下进行延伸形成DNA。
④方式:指数扩增=2n(n为扩增循环的次数)
(3)人工合成法:基因较小,核苷酸序列已知,可以人工合成。
例1 下列获取目的基因的方法中需要模板链的是( )
①从基因文库中获取目的基因 ②利用PCR技术扩增目的基因 ③反转录法 ④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成
A.①②③④ B.①②③ C.②③④ D.②③
二、基因表达载体的构建
1.表达载体的组成:目的基因+ + +标记基因等。
2.启动子:位于基因的 ,它是 和结合的部位,驱动基因转录产生mRNA。
3.终止子:位于基因的 ,终止 。
4.标记基因: 受体细胞是否含有目的基因。
5.表达载体的功能:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且 给下一代;同时使目的基因_________________和发挥作用。
6.不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同,基因表达载体的构建上也会有所差别。
例2科学家在培育抗虫棉时,经过了许多复杂的过程和不懈的努力,才获得成功。起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中,然后导入棉花的受精卵中,结果抗虫基因在棉花体内没有表达。然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端),导人棉花受精卵,长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端),导入棉花受精卵,结果成长的植株,有了抗虫能力。由以上过程推知,作为目的基因的运载体应具备的结构是( )
A.目的基因、启动子 B.目的基因、终止子
C.目的基因、启动子、终止子 D.目的基因、启动子、终止子、标记基因
三、将目的基因导入受体细胞
(一)转化:目的基因进人受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和 的过程。
(二)方法
1.将目的基因导入植物细胞
(1)农杆菌转化法
①农杆菌特点:易感染 植物和裸子植物,对___________植物没有感染力;Ti质粒的 可转移至受体细胞,并整合到受体细胞的染色体上。
②转化:目的基因插人 农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。
(2)基因枪法
基因枪法:是单子叶植物中常用的一种基因转化方法,但是成本较高。
(3)花粉管通道法
花粉管通道法:这是我国科学家独创的一种方法,是一种十分简便经济的方法。(我的的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的)
2.将目的基因导入动物细胞
(1)方法: 注射技术。
(2)操作程序:目的基因表达载体 →取卵(受精卵) →显微注射→注射了目的基因的受精卵移植到____性动物的_______________________________内发育→新性状动物。
3.将目的基因导人微生物细胞
(1)原核生物特点:繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。
(2)大肠杆菌最常用的转化方法是: 处理细胞→ 细胞→表达载体与感受态细胞混合→ _________ 细胞吸收DNA分子。
例3采用基因工程的方法培育抗虫棉,下列导入目的基因的做法正确的是 ( )
①将毒素蛋白注射到棉受精卵中②将
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