2017_2018版高中生物第一章基因工程1.1.2获取目的基因构建基因表达载体课件苏教版选修.pptVIP

答案　不能。因为SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因。质粒上的抗性基因是标记基因。标记基因用于鉴定受体细胞是否成功导入目的基因，以便将含目的基因的细胞筛选出来，若被破坏，无法进一步筛选。 (2)构建基因表达载体时，能否用SmaⅠ酶切割质粒？为什么？ 答案 答案　可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。 (3)与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点是什么？ (1)选用同一种限制酶切割目的基因和载体的原因：选用同一种限制酶切割会产生相同的黏性末端，可以在DNA连接酶的作用下将切割的目的基因和载体连接起来。 (2)基因工程操作时往往用两种限制酶分别切割目的基因的两端以及载体的原因：①如果用一种限制酶切割，目的基因两侧的末端以及质粒切口的两个末端都是互补的，因此连接时可能会出现载体与载体、目的基因与目的基因、目的基因与载体三种连接情况，而符合要求的只有载体与目的基因的连接。②如果用两种不同的限制酶进行切割就可以有效避免载体与载体以及目的基因与目的基因的连接，提高连接的有效性。 总结提升　 解析　由于受体细胞有植物、动物和微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的方式不同，所以基因表达载体的构建也会有所差别，不可能千篇一律。 拓展应用 4.下图为基因表达载体的模式图，下列有关基因工程中载体的说法，错误的是 A.基因表达载体的构建是在生物体外完成的 B.任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别 C.图中启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别 和结合的部位 D.抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导 入了目的基因 解析 答案 5.如图是利用基因工程技术培育转基因植物生产可食用疫苗的部分过程示意图，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。下列说法错误的是 A.图示过程是基因工程的核心步骤 B.表达载体构建时需要用到限制酶SmaⅠ C.抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗 原基因的细胞筛选出来 D.除图示组成外，表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构 答案 解析 解析　图示过程为基因表达载体的构建过程，是基因工程中的核心步骤。构建过程中需要将目的基因完整切割下来，此时要用到限制酶PstⅠ、EcoRⅠ。限制酶SmaⅠ不可用，它会破坏目的基因的完整性。抗卡那霉素基因是标记基因，目的是便于鉴定和筛选含有目的基因的细胞。基因表达载体包括启动子、目的基因、终止子和标记基因等。 第2课时　获取目的基因、构建基因表达载体 第一章　第一节　基因工程概述 学习导航 1.概述获取目的基因的方法，特别说明PCR的原理。 2.结合图1－10，说出基因表达载体的构建。 重难点击 获取目的基因的途径及基因表达载体的构建。 课堂导入 方式一　抑制疾病传播的转基因蚊子 巴西等拉美国家深受致倦库蚊的危害。致倦库蚊可携带多种病毒和寄生虫，能够传播脑炎、丝虫等传染病，而这些传染病常年在拉美国家肆虐。为了抑制疾病的传播，巴西科学家培育出了一种转基因雄性致倦库蚊。科学家在雄性致倦库蚊体内植入一种特殊基因，当具该基因的转基因雄蚊与野生雌蚊交配时，这种基因可以进入雌蚊的基因组，并使雌蚊死亡，从而减少了该种蚊子的数量，达到抑制疾病传播的目的。怎样才能最终得到转基因雄蚊呢？让我们一起来学习基因工程的基本操作程序吧！ 方式二　师：出示我国有知识产权的转基因抗虫棉的培育图解： 问：转基因抗虫棉的培育需要哪些步骤？ 学生看图并回答：首先要获得目的基因，其次将目的基因连接到Ti质粒上，然后将重组的Ti质粒导入受体细胞，最后要重建转基因植物。 根据学生回答补充：还需检测抗虫基因是否已经进入棉花植株，并由此引出基因工程的四部曲。 一、获取目的基因 内容索引 当堂检测 二、构建基因表达载体 一、获取目的基因 基因组文库：包含某种生物 的基因文库 部分基因文库：包含某种生物 的基因文库 基础梳理 1.通过基因文库获取目的基因 (1)概念 先用 等方法将某种生物细胞的整个基因组DNA切割成大小合适的片段，再将这些片段分别和 连接起来，导入受体菌的群体并 起来，各个受体菌分别含有这种生物的 ，这个群体称为基因文库。 (2)种类 载体 酶切 储存 不同基因 全部基因 部分基因 2.通过PCR技术扩增目的基因 (1)原理： 。 (2)基本过程 ①加入反应物质：在离心管中加入所需要的模板DNA、 、4种_____ 以及