化学发光免疫标记分析技术基本原理.pptx

免疫分析;抗原抗体免疫反应特点;免疫学检测;1977年诺贝尔生理学或医学奖得主雅洛 Yalow ;;化学发光;化学发光免疫分析技术是将化学发光体系与免疫反应相结合，用于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术。 美国临床化学会议规定：凡是通过测量光子计数的方法都是化学发光，包括通过酶促luminol发光。 化学发光免疫分析1980’s进入体外诊断领域，第一台全自动检测仪1993年诞生。;; 鲁米诺及其衍生物的增敏化学发光系统;;碱性磷酸酶及其衍生物的化学发光系统;;直接化学发光：以化学物质,如异鲁米诺、吖啶酯等直接标记抗原或抗体，免疫反应后，直接引发化学发光反应进行检测。;间接化学发光：用参与发光反应的酶来标记抗原或抗体，免疫反应后，加入发光底物，测定发光体系的发光强度来进行抗原或抗体的检测。;电化学发光：一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，直接由三联吡啶钌 [Ru(bpy)3]2+ 标记抗体，反应时标记物直接发光。;第一代：鲁米诺及其衍生物 第二代： 直接标记：吖叮酯标记 间接标记：碱性磷酸酶-金刚烷系统 电化学发光：三联砒啶钌;化学发光按检测方式分为： 随机处理模式：管式化学发光（磁微粒分离） 批处理模式： 板式化学发光（物理吸附）;适合流行病调查、疾病预防与控制、体检中心，以及医院血站等大样本检测项目的使用（比如HIV、TP、HCV和乙肝两对半等）。;采用管式或微粒子发光，测定快速、准确； 可以随到随测，适用于医院急诊； 定量检测的标准曲线存储在试剂条形码中，可在2-4周内直接使用。;磁微粒示意图;酶标;放免;酶标;安全性好：彻底消除了放射性危害，环保、安全。到目前为止，还未发现CLIA的危害性。 光信号持续时间长：辉光型（glow type）的CLIA产生的光信号持续时间可达数小时甚至一天。简化了实验操作及测量。容易实现连续、动态、重复测定。 分析方法简便快速：绝大多数分析测定均为仅需加入一种试剂（或复合试剂）的一步法，容易实现自动化。 结果稳定、误差小：样品系直接自己发光，不需要任何光源照射，免除了各种可能因素（光源稳定性、光散射、光波选择器等）给分析带来的影响，使分析结果灵敏稳定可靠。;甲状腺激素 生殖激素 肾上腺/垂体激素 贫血因子 肿瘤标志 感染性疾病;结论