生物奥赛集训2讲解材料.ppt

真核细胞主要的细胞器及细胞骨架;内容提要;一、线粒体和叶绿体;（一）形态、结构和分布;线粒体的大小和数量反映了细胞的能量需求;;线粒体的结构 （a）浸软的线粒体的扫描电镜照片，显示被线粒体内膜折叠所围绕的内部基质。 （b）线粒体的三维重建结构图 在重建图中，外围的线粒体内膜以蓝色表示，而穿入基质形成嵴的内膜则用黄色表示。 （c）线粒体的内部结构模式图 ;基质类囊体 又称基质片层，伸展在基质中彼此不重叠； 基粒类囊体 或称基粒片层，可自身或与基质类囊体重叠，组成基粒。;（二）线粒体和叶绿体是半自主性细胞器;线粒体和叶绿体具有自身的遗传系统;mtDNA编码的基因包括 rRNAs, tRNAs和 一些线粒体蛋白。;The organization of the liverwort(地钱) Chl genome;线粒体和叶绿体对核遗传系统的依赖;;蛋白质向线粒体的转运;线粒体前体蛋白在胞质中合成后，通过与胞质中的hsp70分子伴侣的相互作用保持未折叠的状态。;;;（三）、线粒体和叶绿体的增殖和起源;线粒体和叶绿体的 起源; 线粒体和过氧化物酶体有一些共同特征： 两者都是通过预先存在的细胞器分裂而增殖的； 两者都从细胞质基质中输入预生成的蛋白质； 两者都能进行类似的氧化代谢。在一些哺乳动物中已经发现它们都存在一种酶—丙氨酸/乙醛酸氨基转移酶。 ; 通过蔗糖密度梯度离心分离到的纯化的过氧化物酶体的电镜照片，内部通常含有致密的氧化酶晶体核心。 过氧化物酶体是过氧化氢（H2O2）合成和降解的场 所，通过两步反应催化。;过氧化物酶体（也称微体）是一种多功能细胞器，含有50多种酶。这些酶涉及各种不同的活性。 过氧化物酶体也存在于植物中，植物幼苗中含有一种独特的过氧化物酶体——乙醛酸循环体。植物幼苗依靠储存的脂肪酸提供能量和原料，以形成新的植株。 ;植物幼苗中的乙醛酸循环体的定位（通过对过氧化氢酶的细胞化学染色而显现）。棉花种子中子叶切片的光镜照片。;由线粒体或过氧化物酶体功能异常 引起的疾病;许多遗传病的特征是单一的过氧化物酶缺乏，如：肾上腺脑白质病变（ALD）。此病是由于缺乏一种膜转运蛋白，致???不能将极长链脂肪酸（VLCFA）转运到过氧化物酶体中进行正常代谢。由于缺乏这种膜转运蛋白，VLCFA在脑部中积累并破坏髓鞘，引起肾上腺机能不全和神经功能异常。;二、细胞内膜系统;;（一）、研究细胞内膜系统的技术;2.绿色荧光蛋白的应用 将编码GFP的DNA与编码所研究蛋白的DNA融合，得到的嵌合DNA 导入能在显微镜下观察的细胞。嵌合DNA一旦进入细胞，所表达的嵌合蛋白含有融合于所研究蛋白末端的GFP。;3.亚细胞组分的生化分析;4.遗传突变体的研究 筛选细胞质膜上蛋白质表现出异常分布的酵母突变体细胞，研究蛋白合成后的转运。;（二）、内质网;;2 内质网的功能;一些蛋白是在刚起始合成不久转移到内质网膜上，继续蛋白的合成。在rER上，多肽链边合成边进入内质网腔，主要是： 分泌蛋白 膜整合蛋白 内膜系统细胞器中的可溶性驻留蛋白： 这类蛋白需要和其他细胞组分严格隔离，或者合成后需要进行修饰和加工。 ;在 “游离”核糖体上合成的蛋白;（2） sER的主要功能是脂类合成的重要场所。 合成细胞所需的几乎全部的膜脂。 包括磷脂和胆固醇，其中最主要的是磷脂酰胆碱（卵磷脂）。 在内质网膜上合成的磷脂迅速转向内质网腔面，可能和磷脂转位因子（转位酶）有关。 磷脂的转运方式： 　　出芽或磷脂转换蛋白（PEP）的协助 ;（３）在rER腔内进行蛋白质的修饰和加工。 进入内质网中的蛋白质发生的主要化学修饰有糖基化、羟基化、酰基化和二硫键的形成。;糖基化伴随多肽的合成同时进行，是最为常见的修饰方式，发生在内质网腔面。 糖基化是在糖基转移酶的催化下，由磷酸多萜醇将寡糖基转移到有关的氨基酸上。;糖基化的方式： (1) N-连接的糖基化（内质网中） 　N-乙酰葡萄糖胺寡糖基转移到Asn残基上 (2) O-连接的糖基化（主要在高尔基体中） 　N-乙酰半乳糖胺寡糖基转移到Ser, Thr残基或者Hylys/Hypro上。 ;（４）新生多肽的折叠和组装 蛋白质在内质网中的停留时间很大程度上取决于蛋白正确折叠所需的时间。 畸形肽链或未装配的蛋白亚基，一般不能进入高尔基体中，在被识别后，通过转位子Sec61p复合体从内质网腔转至细胞质基质，被蛋白酶体降解。 ;内质网膜腔面上有蛋白二硫键异构酶，帮助和促进蛋白正确折叠。 内质网中有结合蛋白（binding protein, Bip， chap