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- 2018-04-07 发布于天津
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分泌型表达载体——基因工程技术与应用及运用.ppt
分泌型表达载体
----基因工程技术与应用;
;分泌型表达载体——原核
原核常用的信号肽:
碱性磷酸酶的信号肽和蛋白质A的信号肽
pTA1529 ----phoA (碱性磷酸酶)
pINⅢ系统---- ompa(外膜蛋白)
PEZZ18----蛋白A
;分泌型表达载体;pINIII系统
D下游,编码信号肽, 可引导蛋白跨膜
2、优点:分泌表达,避免降解。 ; pEZZ18
Plac:Lac启动子
Pspa:金黄色葡萄球菌蛋白A启动子
S:蛋白A的信号肽序列
两个合成的Z功能域
(结合lgG ,琼脂糖层析柱)2;分泌型表达载体——真核
酵母常用 信号肽序列:α因子、酸性磷酸酶(PHO5)、蔗糖酶(SUC2)等的信号肽。
α因子信号肽包含83个氨基酸的前导肽及后面的一段由Lys-Arg
(Glu-Ala)l-2或Lys-Arg-Glu-Ala-Asp-Ala氨基酸序列组成的问隔肽。膜结合蛋白酶KEX2基因产物识别Lys-Arg C端,STEl3基因产物则识别(Glu-Ala)l一2或Asp-Ala外侧。
常用的分泌表达载体有:
pPIC9K、pPICZα、pGAPZα系列——α因子
;分泌型表达载体;分泌型表达载体——真核;毕赤酵母表达载体pGAPHα的构建;毕赤酵母表达载体pGAPHI-xyn2的构建;
借助计算机设计,人工合成信号肽序
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