DNA操作技术-2013-12-1.pptVIP

DNA操作的基本技术 (Basic technologies for DNA manipulation) 二、 核酸印迹技术（ Blotting techniques） 常用的核酸印迹技术有：Southern blot、 Northern blot、原位杂交等。 3. 原位杂交技术 原位杂交（in situ hybridization，ISH）即利用分子杂交技术对细胞或组织中基因及其表达产物定位分析的一种技术； 可用于基因及其表达产物的定位分析。 四、染色质免疫沉淀（Chromatin immunoprecipitation, ChIP） ChIP是免疫沉淀法和PCR法的结合 研究DNA与蛋白质相互作用的方法 研究与特定蛋白质（如转录因子）结合的基因组序列，或者反之； 与基因芯片结合，成为ChIP-on-chip，可以进行高通量筛选。 一、DNA芯片（DNA chip） 当上述两种载体所表达的融合蛋白能够相互作用时，功能重建的反式作用因子能够激活酵母基因组中的报告基因HIS、LacZ、 ADE、 MEL1，从而通过功能互补和显色反应筛选到阳性菌落。 将阳性酵母菌株中的AD-Library载体提取分离出来，可对载体中插入的文库基因进行DNA测序和分析, 即可知道相互作用蛋白。 是在酵母双杂交系统基础上发展的 存在蛋白质的合成、加工和修饰