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植物生理学实验组织逆境伤害程度测定2009
* * 植物组织逆境伤害程度的测定 ——电导法 （-20oC,20min冷冻材料 ） 学生进入实验室先洗试管 逆境伤害程度的测定方法： 1 紫外法： 根据渗出物质对紫外的吸收 2 电导法: 一、实验原理： 植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择透性能力。 逆境：高温、干旱、冻害、冷害、污染、酸雨 当植物受到逆境影响时，细胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，如植物组织浸入无离子水中，水的电导将因电解质的外渗而加大。 电导仪测定外液的电导度增加值，求得伤害程度。 膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关，也与植物抗逆性的强弱有关。因此，电导法目前已成为作物抗性栽培、育种上鉴定植物抗逆性强弱的一个精确而实用的方法。 大叶黄杨叶片 二、实验材料： 材料处理： 正常植物叶片 -20℃冷冻胁迫处理，处理20min。 三、操作步骤程序： 1、洗刷试管： 2、材料处理 3、电导率测定 4、整理数据, 结果计算(课后算) 三、操作步骤程序： 1、洗刷试管： 试管刷沾洗涤液刷一遍 自来水3—4遍冲净 去离子水冲1遍 去离子水中含有吐温-20 （洗用会出现泡沫） 吐温作用：阴离子表面活性剂，促进水分与叶片表面接触。 吐温20－聚氧乙烯(20)山梨醇酐单月桂酸酯 2、材料处理操作： 正常、冻害各取3个叶片，洗净 各打取叶圆片27个以上, 放到小烧杯中用去离子水冲洗 每支试管9个叶圆片,加15ml蒸馏水 塑料纱网用去离子水漂洗一下， 放入试管(距液面1-2cm) 抽气15min(不盖塞)，取出纱网 抽气作用？ 纱网作用? 防止抽气时叶圆片被抽出。 防止高CO2气源和口中呼出的CO2进入试管 放置到塑料烧杯中(不盖塞子)，统一抽气10～15min。（设置空白1只试管） 3、电导率测定： 抽气后材料室温摇动20min， 测定初电导值S1 (设一空白) 沸水浴10min杀死组织， 自来水冷却 用力摇1-2min后， 测定终电导S2 *
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