植物生理学实验光合呼吸速率荧光参数测定2009.pptVIP

●光合作用是唯一能把太阳能转化为稳定的化学能贮藏在有机物中的一个化学过程，是农作物产量形成的决定性因素。 ●植物生理学、生态学、作物栽培学、作物育种学、林学、植物营养、病理等研究工作中，经常需要测定光合速率，根据实验材料选择一种快速、准确而又简便的光合速率测定方法，以满足科学研究的需要。 光合作用的总反应式： CO2 + 2H2O* + 4.69kJ → (CH2O) + O*2 + H2O 原则上可以测定任一反应物的消耗速率或产物的生成速率来表示光合速率。 测定方法：CO2的吸收 O2的释放 有机物的积累 光－光合曲线、表观量子效率的测定 测定同一叶片不同光强下的光合速可绘制光－光合曲线 CO2－光合曲线的测定： 测定同一叶片不同CO2下的光合速率，绘制曲线 光呼吸的测定 测定的项目： 实验六. 植物叶片叶绿素荧光参数的测定 一、目的意义 二、叶绿素荧光的产生及与光合作用的关系 三、基本荧光参数 四、PPEA植物效率仪操作 一、目的意义 叶绿素荧光参数反映PSII对光能吸收、激发能传递和光化学反应等光合作用的原初反应过程。 叶绿素荧光技术是诊断植物体内光合机构运转状况、分析植物对逆境响应机理的重要方法。在植物抗性生理、植物生态学、作物生理学、藻类学的研究以及检测环境污染等广泛应用。 该方法具有灵敏、简便，快速和对植物无破坏损伤的特点。 二、叶绿素荧光的产生及与光合作用的关系 光合机构吸收的光能有三个可能的去向： 1、光化学反应,引起反应中心的电荷分离及后来的电子传递和光合磷酸化,形成用于固定、还原二氧化碳的同化力(ATP和NADPH),氮素还原，光呼吸等。 2、转变成热散失； 3、以荧光的形式发射出来。 由于这三者之间存在此消彼长的相互竞争关系,所以可以通过荧光的变化探测光合作用的变化(图1)。 图1 叶绿素分子的光激发与退激 激发态2 激发态1 退激 实际上,以荧光形式发射出来的光能在数量上是很少的,还不到吸收的总光能的3%。 在很弱的光下,光合机构吸收的光能大约97%被用于光化学反应,2.5%被转变成热散失,0.5%被变成荧光发射出来； 在很强的光下，当全部PSII反应中心关闭时，吸收的光能95%－97%被变成热，而2.5%－5.0%被变成荧光发射。 当逆境影响到叶片光能的捕获和转化、CO2固定和还原等过程时，叶绿素荧光的发射强度就会改变。 通过测量叶绿素荧光的变化就可推知光能用于光化学反应以及用于热耗散等过程的高低，进而计算出植物的光化学效率等参数。 叶绿素荧光诱导动力学 当一片经过充分暗适应的叶片从黑暗中转入光下后，叶片的荧光产额会随时间发生规律性的变化，典型荧光诱导动力学曲线上几个特征性的点分别被命名为O、I、D、P、S、M和T（图） 在照光的第1秒钟内，荧光水平从O上升到P,这一段被称为快相；快相与PSII的原初过程有关。 从P下降到T，这一段被称为慢相。慢相主要与类囊体膜上和间质中的一些反应过程包括碳代谢之间的相互作用有关。 Fo：最小荧光也称初始荧光 是PSⅡ反应中心完全开放时的荧光产量。 Fm：最大荧光 它是PSⅡ反应中心完全关闭时的荧光产量。 Fv：可变荧光 Fv=Fm－Fo，暗适应最大可变荧光，反映QA的还原情况。 三、基本荧光参数 Fv/Fm：PSⅡ最大光化学效率 反映PSⅡ反应中心最大光能转换效率。 PI：光合性能指数 以光合吸收为基础，是一个综合反映光合机构活性的参数。与光合机构对光能的吸收、转化以及电子传递等过程有关。 PI是快速荧光动力曲线参数中对环境变化最敏感的参数之一，可较准确反应植物光合机构的状态，常用来估计整个光化学反应对环境的响应。 PI = [RC/ABS] [φPo/(1-φPo)] [Ψo/(1-Ψo)] φPo原初光化学反应的最大量子产额 Ψo捕获光能用于QA-以后的电子传递的能量比例 四、Pocket PEA植物效率仪及操作 PPEA主机 光学测定装配器 液晶显示屏 测定键 电源开关键 充电指示灯 充电器插口 PPEA配件 暗适应叶夹 软件 充电器 不锈钢滑片 (传输线、计算机、Pocket PEA专用数据传输和处理软件) （一）仪器操作步骤 1. 按On/Off键 ， P