微生物学[第二章微生物的纯培养和显微镜技术]山东大学期末考试知识点复习.pdfVIP

山东大学 期末考试知识点复习 第二章 微生物的纯培养和显微镜技术 一、要点提示 1．由于微生物个体微小，在绝大多数情况下对微生物的研究、利用都是使 用其群体，称为培养物。由于一般情况下只有纯培养物才能提供可以重复的结果， 因此从混杂的天然微生物群中分离获得某特定的微生物纯培养，是研究和利用微 生物的最重要的环节之一。采用稀释涂布或平板划线技术在琼脂平板上得到微生 物的单菌落是最常用的纯种分离手段，而在分离、转接及培养微生物纯培养时防 止被其他微生物污染的无菌操作技术是进行微生物学研究的基础，并广泛地被其 他学科和生产实际所利用。 2 ．通过分离纯化得到的微生物纯培养物，必须通过各种保藏技术使其在一 定时间内不死亡、不会因发生变异而丢失重要的生物学性状、不会被其他微生物 污染或因自身泄漏而污染环境，否则就无法真正保证微生物研究和应用工作的顺 利进行。传代培养、冷冻真空干燥保藏、低温冰箱保藏及液氮保藏是通常使用的 微生物菌种保藏技术。 3 ．微生物个体微小，通常必须通过显微镜才能观察到其个体形态，而进行 显微观察时，分辨率和反差是决定显微观察效果的两个最重要的因素。它们与显 微镜的特性有关，也取决于样品的制备与观察技术。无论是光学显微镜还是电子 显微镜，其设备和技术发展迅速，应用面越来越广泛和深入。 4 ．在显微镜下微生物的大小与形态千差万别，丰富多彩，是区分不同微生 物和对其进行分类、鉴定的重要依据之一。 二、重点、难点剖析 1．无菌技术是最基本的微生物学实验操作技术，其核心是无菌概念的建立， 以及正确而严格地按实验教材和实验课的要求，掌握在各种情况下的具体应用原 则和操作规范。 2 ．分离获得某特定的微生物纯培养，是研究和利用微生物的基础。获得纯 山东大学 期末考试知识点复习 培养的方法有固体培养基分离、液体培养基分离和单细胞挑取 3 大类(表 2-1)， 其中用固体培养基获得单独的微生物菌落是最常用、最基本的方法。此外还有活 细胞或活体分离法，如噬菌体和动植物病毒纯培养的分离等。 3 ．保证所用菌种性状的稳定是微生物学工作最重要的基本要求，否则生产 或科研都无法正常进行。而目前使用的各种微生物保藏技术归纳起来不外乎生活 态或休眠态两种。下面所列的是目前较为常用的一些微生物菌种保藏方法。 值得指出的是，由于微生物的多样性，不同的微生物往往对不同的保藏方法 有不同的适应性，迄今为止尚没有一种方法能被证明对所有的微生物均适宜。因 山东大学 期末考试知识点复习 此，在具体选择保藏方法时必须对被保藏菌株的特性、保藏物的使用特点及现有 条件等进行综合考虑。对于一些比较重要的微生物菌株，则要尽可能多的采用各 种不同的手段进行保藏，以免因某种方法的失败而导致菌种的丧失。 4 ．显微镜是微生物学研究的重要工具，对各类显微镜原理及应用特点的全 面、综合了解是微生物学的重点内容之一(表2-2) 。 5 ．样品制备和显微观察也是微生物学的基本操作之一，应按实验教材和实 验课的要求，掌握在各种情况下微生物样品制备和显微观察的基本原理和操作规 范，了解各微生物类群在显微镜下的基本形态特征。 三、术语或名词 山东大学 期末考试知识点复习 1．菌落(colony) 单个微生物细胞在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁 殖到一定程度形成的肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体。 2 ．菌苔(lawn) 固体培养基表面众多菌落连成一片时所形成的微生物生长群 体。 3 ．平皿(Petri dish) 由玻璃或透明塑料制成的圆形皿底和皿盖组成，皿盖可 覆盖于皿底之上，防止空气中微生物的污染。其英文名称是为纪念其发明者Julius Richard Petri 。 4 ．纯培养物(pure culture) 由一种微生物组成的细胞群体，通常是由一个单 细胞生长、繁殖所形成。 5 ．培养基(culture medium) 供微生物生长、繁殖的营养基质，根据其中固 化剂含量的不同可分为固体、半固体、液体3 种。 6 ．无菌技术(aseptic technique) 在分离、转接及培养纯种微生物时，防止其 被环境中微生物污染或其自身