基因病的诊断总2012.pptVIP

GJB2基因 定位于13q11,gDNA长5510 bp,含有2个外显子，只有2号外显子参与编码,编码区长681bp GJB2基因编码产物为间隙连接蛋白分子26（connexin 26，CX26） CX26在细胞与细胞间形成间隙连接，在感觉毛细胞受到声音的刺激后钾离子回流到内淋巴液的过程中起着重要的作用。 检测方法：PCR+测序 MLPA 多重连接探针扩增技术(Multiplex ligation-dependent probe amplification ,MLPA) MLPA是一种高通量、针对待测核酸中靶序列进行定性和定量分析的新技术。这一技术最先于2002年由荷兰的 Schouten JP等报道。 公司试剂盒，可以对DMD基因的79个外显子进行缺失和重复检测。 DNA模板 MLPA原理 扩增产物经毛细管电泳后，扫描图 软件分析：经正常对照标化后的柱形图。 DMD遗传咨询 DMD为X连锁隐性遗传病，女性携带者，所生男孩有50%为患儿，所生女孩有50%为携带者。 女性携带者中约8%可表现有轻重不同的症状，且有较高患扩张性心脏病的风险。 先证者的母亲有2/3的可能为携带者。 母亲外周血中未检出致病基因：1、先证者为新发突变；2、母亲为生殖腺嵌合体（15～20%）。 有DMD家族史或曾生育患儿的女性再生育时须行DMD产前诊断。 脊髓性肌肉萎缩症 脊髓性肌肉萎缩症 SMA 由于脊髓前角细胞运动神经元变性 导致近端肌肉萎缩和无力 发病率1/10000 遗传方式：常染色体隐性遗传 临床特征 婴儿期学龄前及青春期发病 表现为四肢的近端肌肉对称性 进行性无力及萎缩 肌张力降低，腱反射减退或消失 呼吸衰竭 肌电图:神经元性损害 肌酶学检测:多为正常 临床类型 发病机制 SMN基因 定位：5q11.2-11.3。 结构：长20kb，8个外显子， 突变：98.7%为外显子7和/或8的缺失 2.3%为点突变与缺失相结合的 杂合子 PCR-酶切法检测SMN基因 原理: SMN2的7、8号外显子分别存在一个DraI 和DdeI酶切位点，而SMN1 没有 其PCR产物进行酶切后可以检测SMN1是否有7、8号外显子的缺失 PCR反应体系 7号外显子PCR反应条件 8号外显子PCR反应条件 PCR产物酶切体系及条件 测 序 对SMN基因EXON7、8进行直接测序 可确证PCR-酶切法的检测结果 可避免PCR-酶切法酶切不全造成的假阴性结果 非综合征型耳聋 耳聋简介 听力丧失是最常见的感觉障碍。 发病率：1/500 新生儿 非综合征型耳聋(nonsyndromic hearing loss, NSHL)：指不伴有耳外组织异常或病变的耳聋。 遗传方式：常隐、常显、X连锁、线粒体遗传 耳聋相关基因 已经定位120多个 NSHL基因位点 。 克隆确认了41个核基因 。 线粒体基因2个。 最常见的致病基因： GJB2 、SLC26A4 、mtDNA A1555G 1998年夏家辉院士等成功地克隆了人类遗传性耳聋（GJB3）疾病基因。 中国本土克隆的第一个基因。 Nature Genetics volume 20 december 1998, P370-373. Mutations in the gene encoding gap junction protein ?-3 associated with autosomal dominant hearing impairment (湖南师大附中内部资料)高三化学习总复习课件：高三第五次周考试卷分析课0801(课件)(培训课件)班组建设与5S管理培训多媒体计算机系统常用硬件设备教材 单基因病的诊断 中南大学 医学遗传学国家重点实验室 薛晋杰 xuejinjie@sklmg.edu.cn 1bp 1Kb 2Mb 6Mb 100Mb 亚带、带、区、臂 整条、整组染色体 基因疾病 ※基因组疾病 染色体疾病 基因病诊断高技术平台 基因组疾病诊断高技术平台 染色体病诊断高技术平台 以PCR加DNA测序为基础，共由 10余项技术组成。 以SNP array加Bac克隆原 位杂交（FISH）技术为 基础，共由10余项技术组成。 以染色体G显带技术加染色体 原位杂交技术（FISH）为基础， 共由20余项技术组成。 …… 概 述 单基因病 ：指由于单个基因的突变而引起的遗传 病，其遗传方式符合孟德尔定律。 人类大约有3万个基因，目前约有2000个单基因病的致病基因被鉴定。 基因诊断： 利用分子遗传学技术在DNA或RNA水平上对某一基因进行突变分析，从而对特定的疾病进行诊断。 多数单基因病