《发酵工程-1-2008》.pptVIP

发酵工程(fermentation) 第一节 概 述 一、发酵（fermentation)的定义： 用生物催化剂（Biocatalyst)使培养物质转变成产品的生物化学反应。** 生物催化剂：细菌、放线菌、真菌或其解体产物（如酶）和动植物细胞等。 发酵工程（微生物工程，发酵技术）: 指利用微生物的特定性状，通过现代工程技术，在生物的反应器中生产有用物质。 二、发酵工程的历史发展 19世纪末：厌氧发酵（酒精、乳酸、发酵食品） 1945年：通气搅拌发酵罐--好氧发酵（青霉素等抗生素） 20世纪50年代：代谢控制发酵（氨基酸、核酸等） 20世纪70年代：固定化酶连续发酵 20世纪80年代：现代发酵工程技术（与基因操作技术相结合） 现在 ： 与电子技术、基因技术等的紧密结合结合 三、发酵工程在现代生物技术中的地位和作用 发酵工程是生物技术产业化的基础和关键技术， 是生物技术四大支柱的核心，无论传统发酵产品，如抗生素、氨基酸等，还是现代基因工程产品，如疫苗、人体蛋白质等，都需要发酵技术进行生产。 四、发酵工程的主要内容 1、生产菌种的选育。 2、发酵条件的优化和控制。 3、反应器的设计 4、产物的分离、提取、精制。 五、发酵的类型 1、微生物细胞为产物的发酵 2、微生物酶的发酵：青霉素酰化酶、淀粉酶等。 3、微生物代谢产物发酵：初级、次级代谢产物。 4、生物转化或修饰化合物的发酵工业 5、微生物废水处理和其他 第二节、发酵工程中的微生物 一、 微生物的类群 概念：通常要用光学显微镜和电子显微镜才能看清楚的生物统称为微生物 What are Microorganisms? Virus (病毒） Non-cell microbes Bacteria (细菌） Archaea (远古细菌） Prokaryotes(原核生物) Algae (藻类） Fungi (真菌:酵母、霉菌） Protozoa (原生动物） Eukaryotes (真核生物 （一）、细菌结构：基本结构：细胞壁、 细胞膜和核区繁殖：主要是二分裂方式菌落：菌种鉴定的重要方式 （三）、酵母 酵母菌是一类单细胞真菌的俗称，分类学上分属于 ： 子囊菌纲和半知菌类。 （四）、霉菌(molds) 霉菌的菌体由分枝或不分枝的菌丝（hyphae)构成。菌丝是真菌营养体的基本单位。 菌丝是中空管状结构，直径一般3～10μm，有分枝，有隔膜或无隔膜 1)营养菌丝(Vegetatile hypha):  在固体培养基上伸入基内的菌丝. 行吸收养料之功能. （五）、病毒 结构：核酸和衣壳（核衣壳）,有些具囊膜 增殖：吸附 注入 合成 装配 释放  三、微生物的来源 （一）从自然界中选育所需微生物： 2、微生物的分离： （1）样品分离前的处理： 温度；膜过滤；离心； 碱处理；有机溶剂处理； 搅动法；土壤增殖法；诱饵法等。 （2）分离方法： 培养基； 抗生素的加入； 稀释法； 滤膜法 : 分离放线菌(0.22-0.45um) 培养温度和时间 （3）接种分离微生物： 平皿长出微生物 斜面，排除相同菌株 3、性能鉴定： 包括菌株的毒性试验、生物活性试验和生产性能试验。 （二）从菌种保藏中心索取 国外： ATCC；NRBC(IFO)；CBS；DSM 国内： CCCCM:中国微生物菌种保藏管理委员会 普通微生物: 中科院微生物所;武汉病毒所 医学微生物: 卫生部生物制品检定所; 中国医科院病毒所 抗生素菌种保藏管理中心: 中国医科院抗生素研究所; 四川抗生素研究所;华北制药厂抗生素研究所 四、菌种的选育 6、培养基成分简单，来源广，价格廉。 7、对温度、pH、离子强度等环境因素不敏感。 8、对溶氧的要求低，便于培养及降低耗能。 （二）诱变育种 诱变育种的过程 2、菌悬液的制备： 要求菌体处于对数生长期，并采取一定措施促使细胞处于同步生长； 菌悬液的均一性； 菌液的细胞浓度； 一般用生理盐水稀释或0.1mol/L的磷酸缓冲液处理。 3、诱变： 4、菌种的筛选 （1）一般变异菌的筛选方案： 从菌体形态变异分析； 平皿快速检测法； 摇瓶培养法。 （2）特殊变异菌的筛选： 2.1营养缺陷型菌株的筛选 ： （2.1.1）浓缩营养缺陷型：