§4核酸化学(12128KB).pptVIP

赵丹丹 第4章 核酸化学 * 3、变性后DNA理化性质变化 A260增高（“增色效应” ) 粘度下降 沉降速度较快 双折射现象消失 比旋度下降 酸碱滴定曲线改变 生物活性丧失 赵丹丹 第4章 核酸化学 * 增色效应（hyperchromic effect） DNA变性时其溶液A260增高的现象 赵丹丹 第4章 核酸化学 * 4、DNA的热变性 熔点或熔解温度（melting temperature ，Tm ）：通常把加热变性使DNA的双螺旋结构失去一半时的温度。 DNA熔解曲线：在DNA连续加热变性过程中，以A260对温度作图，可得到一条S形熔解曲线。 DNA变性的特点：爆发式，变性作用发生在一个很窄的温度范围内，有一个相变的过程。 赵丹丹 第4章 核酸化学 * Tm值一般在82℃ ～95℃之间，大小与G+C含量成正比。 DNA中GC含量与Tm值的关系可用经验公式进行计算： （G+C）%=（Tm – 69.3）×2.44 影响Tm的因素 DNA的均一性 GC含量：公式 介质中的离子强度： 在高环境下Tm值较高，且溶解温度范围狭窄。所以DNA在含盐缓冲液中保存较稳定。 赵丹丹 第4章 核酸化学 * 5、 RNA的变性 RNA分子中有局部双螺旋区，所以也可以发生变性。 特点：只是Tm值较低，且范围较宽。 赵丹丹 第4章 核酸化学 *