《无菌培养基灌装验证方案》.docVIP

1、目的：对生产部制剂车间的灌装机进行培养基无菌灌装试验,通过灌装后的产品污染程度检测灌装工艺能否保证产品的无菌。 2、范围：生产部制剂车间的灌装生产线。 3、责任： 验证小组 设计、组织和协调验证试验。 准备、检查和批准验证方案。 准备验证报告并且流转批准。 评估所有的测试结果。 完成此文件规定的验证报告。 验证小组成员名单 姓名 职务 总经理（验证小组组长） QA经理 生产部经理 制剂主管 制剂技术员 生产部 对灌装车间进行清扫、消毒，保证环境清洁。 操作灌装机。 按照规定的程序进行培养基灌装。 进行日常清洗、维护。 QA 取样。 进行目检。 进行环境监测。 检查和批准验证方案和报告。 4、描述 制剂车间使用x公司的灌装流水线，包括：洗瓶机、隧道烘箱、灌装机、轧盖机，y公司的冻干机进行冻干。 5、程序 使用的设备及材料 洗瓶机 生产厂家 型号 安装地点 最大清洗速度 制剂洗瓶间 133瓶/min 隧道烘箱 生产厂家 型号 安装地点 容量 制剂洗瓶间 133瓶/min 灌装机 安装地点 最大灌装速度 制剂灌装间 133瓶/min 冻干机 生产厂家 型号 安装地点 容量 制剂冻干机房 5m2 灌装材料 瓶子 生产厂家 规格 代码 批号 备注 122102002 1143492 胶塞 生产厂家 规格 代码 批号 备注 2ml 122102020 0114319 铝盖 生产厂家 规格 代码 批号 备注 2ml 122102050 培养基 名称 生产厂家 批号 失效期 胰蛋白胨大豆肉汤(Bacillus Subtilis) ATCC 6633 白色念珠菌(Candida alblcans) ATCC 10231 厂房环境分离菌 培养基准备 在10L血清瓶中加入2L的热注射用水，再加入240g胰蛋白胨大豆肉汤L的热注射用水，整个培养基量为8L。 将配制好的培养基放到高压蒸汽灭菌柜中121℃灭菌30分钟，灭菌后取出血清瓶，从瓶中取4瓶（50ml/瓶）作为阴性对照，其中2瓶于32±2℃培养14天，另外2瓶于23±2℃培养14天。观察有无微生物污染。 培养基无菌灌装 准备无菌的灌装器具(针、硅管、等等)，联接到灌装机上。硅管一头放入灭菌培养基中。 用的瓶子，胶塞和铝盖按标准操作规程（P-SOP-048,P-SOP-049）进行洗涤，灭菌。 按标准操作规程（P-SOP-051）进行液量调节，按标准操作规程（P-SOP-050）进行灌装，每瓶灌装2ml灭菌培养基。 使用2个针头进行灌装，每瓶2ml。灌装的速度为70瓶／分钟。 灌装的总瓶数为3000瓶以上，全部为半压塞。 灌装时将瓶子按顺序放箱中，给箱编上号，以便能够追查出受污染的瓶子灌装时状态。 灌装结束后，将半压塞的培养基转移至冻干机中，在机内压塞。 加塞结束后将瓶子转移至轧盖间进行轧盖。 将灌装好的瓶子倒置于32±2℃培养7天，然后在23±2℃培养7天。 环境检查 5.4.1 按照100级和10,000级洁净级别检查项目实施，下面为实施项目： 5.4.1.1浮游菌测定 5.4.1.1.1在灌装过程中的关键操作点采样。 5.4.1.1.2使用仪器 : FKC-1型浮游空气尘菌采样器()。 5.4.1.1.3参照SOP(QA-SOP-112)《浮游菌测定标准操作规程》进行检测。 5.4.1.2尘埃粒子测定 5.4.1.2.1在灌装过程中的关键操作点采样。 5.4.1.2.2仪器：光散射尘埃粒子计数器（） 5.4.1.2.3参照SOP(QA-SOP-106)《尘埃粒子测定标准操作规程》检测。 5.4.1.3表面菌测定 5.4.1.3.1表面菌采用RODAC培养皿进行测定 5.4.1.3.2在灌装中对各测试点进行取样，特别是在离灌装针头30cm以内的区域。 5.4.1.3.3 对无菌服的袖子和胸部以及操作人员的手套取样。 5.4.1.3.4 参照SOP(QA-SOP-108)《表面菌测定标准操作规程》进行检测。 5.4.1.4 沉降菌 5.4.1.4.1培养皿：营养肉汤琼脂培养平板（φ90）。 5.4.1.4.2参照SOP(QA-SOP-107)《沉降菌测试标准操作规程》进行检测。 灌装培养基灵敏度试验 从灌装的培养基中每1000瓶抽取20瓶，从每箱中均匀取样，20瓶接种0.1ml(含约100CFU)枯草杆菌(Bacillus Subtilis) ATCC 6633，20瓶接种(0.1ml约含100CFU)白色念珠菌(Candida alblcans) ATCC 10231。 剩下的20瓶用于接种0.1ml(含约100CFU)厂房检查分离菌。 将接种枯草杆菌及厂房环境分离菌的瓶子放置到