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2018版 选修1 第2讲 微生物的培养与应用
第2讲 微生物的培养与应用
考纲要求 全国卷五年考情 1.微生物的分离和培养 2017·卷ⅠT37,2016·卷ⅠT39,2016·卷ⅢT39,2015·卷ⅠT39,2014·卷ⅠT39,2014·卷ⅡT39,2013·卷ⅡT39 2.某种微生物数量的测定 2016·卷ⅠT39,2014·卷ⅡT39 3.培养基对微生物的选择作用 2017·卷ⅠT37,2016·卷ⅢT39,2014·卷ⅠT39,2013·卷ⅡT39 考点一| 微生物的实验室培养
(对应学生用书第236页)
[识记—基础梳理]
1.培养基
(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)营养构成:一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。
(3)①种类:按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。
②下表为某微生物培养基的成分
KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 H2O 1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g 1 000 mL 该培养基中可以为微生物提供碳源的是葡萄糖,因为此培养基中加入了琼脂,故该培养基为固体培养基。
2.无菌技术
(1)关键:防止外来杂菌的入侵。
(2)不同对象的无菌操作方法(连线):
[答案] ①—b—Ⅰ ②—b—Ⅱ ③、④—a ⑤—a—Ⅲ、Ⅳ ⑥—b
3.大肠杆菌的纯化培养
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
―→―→―→―→
(2)纯化大肠杆菌的方法
①纯化培养原理:想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落,即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤:接种。
③接种方法:下图甲可表示用平板划线法接种获得的平板;下图乙可表示用稀释涂布平板法接种获得的平板。
④纯化原理:上图甲菌体的分散是通过一系列的连续划线操作实现的;上图乙菌体的分散是通过一系列的梯度稀释和涂布平板操作实现的。
4.菌种的保藏方法
(1)临时保藏法:对于频繁使用的菌种,先接种到试管的固定斜面培养基上培养,然后放入4 ℃的冰箱中保藏。
(2)甘油管藏法:对于需要长期保存的菌种,先将菌液转入灭菌后的甘油中,混匀后放在-20 ℃冷冻箱中保存。[教材边角知识] 选修1 P18“旁栏小资料”,微生物的接种方法只有平板划线法和稀释涂布平板法吗?微生物接种的核心是什么?_________________________________________________________________
_________________________________________________________________
【提示】 不是,微生物的接种技术还包括斜面接种、穿刺接种等方法,其核心是防止杂菌的污染,保证培养物的纯度。 [运用—考向对练]
考向1 考查无菌技术
1.牛奶中富含蛋白质,长期饮用有助于增强体质,但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30 000个。以下是牛奶消毒及细菌检测实验。分析回答:
(1)图中步骤①称为________消毒法。步骤②是________。
(2)培养基中的蛋白胨可以为微生物提供________。进行步骤③操作时,应选用下列中的哪种工具?________。为了避免杂菌污染,此步骤应在________附近进行。
(3)将接种后的培养基和作为对照的________________同时放入37 ℃恒温培养箱中,培养36小时。取出后统计各平板的菌落数,结果如下表所示。应该选择其中稀释倍数为____________的平板进行计数,经过消毒后的牛奶中,细菌数大约是____________/mL。
牛奶稀释倍数 102 103 104 平板1菌落数 87 10 1 平板2菌落数 83 12 1 平板3菌落数 85 10 0 [解析] (1)80 °C恒温水浴15 min是巴氏消毒法,步骤②是进行系列稀释(或梯度稀释)。
(2)培养基中的蛋白胨可以为微生物提供碳源、氮源(和维生素),③是接种,因为需要计数,需用稀释涂布平板法,接种工具是涂布器;为了避免杂菌污染,此步骤应在酒精灯火焰附近进行。
(3)统计各平板的菌落数时,应选择菌落数在30~300的计数,经过消毒后的牛奶中,细菌数大约是(87+83+85)÷3×102=8 500个。
[答案] (1)巴氏 系列稀释(或梯度稀释) (2)碳源、氮源(和维生素) B 酒精灯火焰 (3)一个未接种的培养基 102 8 500个
1.考虑无菌技术的效果:灭菌的效果比消毒要好。
2.考虑操作对象的承受能力:活体生物材料、操作者的手等只能采用消毒,而不能灭菌。
(2018·湖北省七市高三一
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