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制药工程原理与设备-03分离工程基础与设备2反胶束萃取.ppt
* 制药反应工程基础与设备 分离工程基础与设备 江苏大学制药工程原理与设备教学课件 * (二)反胶束萃取 1 基本术语 2 反胶束的溶解作用 3 反胶束萃取的操作 4 萃取的影响因素 5 Applications * 1 基本术语 胶束(micelles):向水中加入表面活性剂S,水溶液的?随[S]增大而下降。当[S]达到一定值后,S缔合形成水溶性胶束, 溶液的表面张力不再随表面活性剂浓度的增大而降低。胶团形成均是S分子自聚集的结果,是热力学稳定体系。 自组装(selfassembly):自动有序聚集的过程。 临界胶束浓度(critical micelle concentration,CMC):S在水溶剂中形成胶束的最低浓度。 反胶束(reverse micelles):若向有机溶剂中加入一定浓度S,在有机溶剂中所会形成胶束。当形成反胶束时,水在有机相中的溶解随[S]线性增大。因此,可通过测定有机相中平衡水浓度的变化,确定形成反胶团的最低表面活性剂浓度。 反胶束的形态:球形或近似球形,也呈柱状。 极性核(polar core): S分子的自组装形成了极性核。 微水相或“水池”(water pool):反胶束内溶解的水。 * 2 反胶束的溶解作用 微水池溶解和分离作用: 反胶团的微水池的水可溶解氨基酸、肽和蛋白质等生物分子, 为生物分子提供易于生存的亲水微环境. 因此,反胶团萃取可用于氨基酸、肽和蛋白质等生物分子的分离纯化,特别是蛋白质类生物大分子。 蛋白质溶解模型: a、水壳模型:蛋白质位于水池的中心,周围存在的水层将其与反胶团壁隔开; b、半岛模型:pro表面存在强烈疏水区,该区直接与有机相接触; c、pro吸附于反胶团内壁; d、pro疏水区与几个反胶团的S疏水尾发生相互作用,被几个小反胶团所“溶解”。 * 2 反胶束的溶解作用 溶解推动力 A 静电作用: 理论上,当溶质所带电荷与表面活性剂相反时,由于静电引力的作用,溶质易溶于反胶团,溶解率或分配系数较大;反之,则不能溶解到反胶团相中。右图为pH值对不同蛋白质的溶解率急剧变化图:当pHpI时,即在带正电荷的pH范围内蛋白质的溶解率接近100%,说明静电相互作用对蛋白质的反胶团萃取起决定性作用。 * 2 反胶束的溶解作用 B 空间相互作用 盐浓度增大对反胶团相产生脱水效应,含水率W0随盐浓度的增大而降低,反胶团直径减小,空间排阻作用增大,pro溶解下降。 如,AOT/异辛烷系统的含水率与I-0.5成正比。图中W0与NaCl浓度关系为: 图还示:AOT/异辛烷系统的含水率与AOT浓度无关,这是多数反胶团系统的共性。 * 2 反胶束的溶解作用 在各pro的pI处(排除了静电相互作用的影响),反胶团萃取实验研究表明:随着M增大,pro的分配系数(m, 溶解率)下降。当M20KD时,m很小。表明随M增大,空间排阻作用增大, pro的溶解率降低。图的结果还表明,要据pro间M的差别可以选择性对pro进行萃取分离。 C 疏水性相互作用 aa的疏水性各不相同,研究表明,除pH和I外,aa或肽的m随aa疏水性的增大而增大。蛋白质的疏水性影响其在反胶团中的溶解形式,因而影响其分配系数。疏水性较大的pro可能以“半岛式”形式溶解。 D 分配系数m(or K): * 3 反胶束萃取的操作 A 萃取的基本方法 B 反萃取 C 分级反萃取 * 4 萃取的影响因素 1) pH value AOT=二-(2-已基已基)琥珀酸酯磺酸钠。 * 4 萃取的影响因素 2) 盐浓度 盐浓度 W0 SProZ 选择性 * 4 萃取的影响因素 3) 盐离子的种类 * 4 萃取的影响因素 4) 蛋白质分子量M * 4 萃取的影响因素 5) S A 种类 B [S] * 4 萃取的影响因素 6) 助表面活性剂 * 5 Applications 1) 蛋白质分离 * 5 Applications 2) 胞内酶的提取 3) 蛋白质复性 3)、蛋白质复性 * 小 结 1 萃取的分类及其特点; 2 分配定律与分配平衡; 3 弱电解质的分配平衡; 4 化学萃取; 5 有机溶剂的选择; 6 乳化现象; * 预习 P17-24 * Thank you for your join
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