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反胶团萃取技术 完成人：食研05班田英杰 学号：s110109015 一 反胶团萃取技术的发展背景 传统的分离方法（如溶剂萃取技术）难以应用于生化产品（如蛋白质、氨基酸、抗生素等）的提取和分离。其主要原因在于这类物质多数不溶于非极性有机溶剂，或与有机溶剂接触后会引起变性和失活；而盐析、沉淀、层析、电泳等生化分离方法又不能实现连续和放大作用。 蛋白质分离上的常见问题：对温度、溶剂等敏感，易变性失活；原料中目标蛋白成分浓度小；杂质含量高，成分复杂；种类繁多，批量的特异性分离比较困难。 因此研究和开发易于工业化的、高效的生化物质分离方法已成为当务之急。反胶团萃取法就是在这一背景下发展起来的一种新型分离技术。 反胶团萃取技术reversed micellar extration：源于20世纪70年代，本质上是一种液液萃取技术，利用表面活性剂在有机相中形成反胶团，从而在有机相中形成分散的微水环境，使生物分子在有机相（萃取相）内存在与反胶团的微水环境，从而避免生物分子特别是蛋白质类生物活性物质难于溶解在有机相中或在有机相中发生不可逆变性的现象。其实质是蛋白质在水相和反胶团微水相间的分配过程。 二 反胶团萃取技术简介 1 反胶团萃取技术原理 反胶团萃取：是利用反胶束将组分分离的一种分离技术。表面活性剂是反胶团溶液形成的关键。 表面活性剂：具有固定的亲水亲油基团，在溶液表面能定向排列，降低表面张力的物质。 临界胶束浓度：表面活性剂在溶剂中缔合形成胶团的最低浓度，用CMC表示，是体系特征值。不同实验方法所得的CMC难以完全一致，但是突变点总是落在一个很窄的范围。 正胶团：极性溶剂（水）中，表面活性剂的浓度超过其临界胶束浓度后（严格地说是一个很窄的浓度范围），表面活性剂分子开始发生缔合，形成亲水基向外、疏水基向内的具有非极性内核的多分子聚集体。 反胶团：非极性有机溶剂中，表面活性剂的浓度超过其临界胶束浓度后, 分子自发形成的亲水基向内、疏水基向外的具有极性内核(polarcore)的多分子聚集体。是一种自我组织和排列而成的，并具有热力学稳定的有序构造。其形成的极性内核具有溶解物质的能力，极性核溶解了水后就形成了“水池”或微水相。 正胶团示意图 反胶团示意图 正胶团和反胶团的形成均是表面活性剂分子自发聚集的结果，是具有热力学稳定的有序构造。 反胶团萃取原理：当含有反胶团的有机溶剂与蛋白质等组分的水溶液接触后，反胶团的极性内核在溶解了水后形成的微水相，可进一步选择性的溶解蛋白质、核酸、氨基酸等亲水性的生物大分子；该微水相可保护生物物质的活性，从而达到溶解和分离生物物质的目的。 从宏观上看，反胶团萃取是有机相-水相间的分配萃取，和普通的液液萃取在操作上具有相同的特征；从微观上看，是从主体水相向溶解于有机溶剂相中的反胶团微水相中的分配操作。从原理上看；可以看做液膜分离操作的一种。 反胶束萃取蛋白质的动力学：由于静电吸引作用，邻近蛋白质分子从水溶液中扩散到两相界面表面活性剂分子层；在界面形成包含蛋白质的反胶束；含有蛋白质的反胶束在有机相中扩散离开界面。 2 蛋白质溶解的四种模型 (1)水壳模型：蛋白质位于水池的中心，周围存在的水层将其与反胶团壁隔开。 (2)半岛模型：蛋白质表面存在强烈的疏水区，该区直接与有机相相接触； (3)蛋白质溶解模型3：蛋白质吸附于反胶团内壁； (4)蛋白质溶解模型4：蛋白质疏水区与几个反胶团的疏水尾巴相互作用，被几个小反胶团所“溶解”。 表面性质不同的蛋白质可能以不同的形式溶解于反胶团相，但对于亲水性蛋白质，目前普遍接受的是水壳模型。 水壳模型 半岛模型 溶解推动力： （1）静电作用：当溶质所带电荷与表面活性剂相反时，由于静电引力的作用，溶质易溶于反胶团，溶解率较大，反之，不能溶解到反胶团相中。 （2）位阻效应：许多亲水性物质，如蛋白质、核酸、氨基酸等，都可以通过溶入反胶团水池来达到它们溶于非水溶剂中的目的。反胶束水池的大小、形状及其中水的活度可通过含水率变化来调节的，进而影响大分子的增溶或排斥，从而达到选择性萃取的目的。 （3）疏水相互作用：蛋白质的疏水性影响其在反胶团中的溶解形式，进而