基因工程(ali)教材课程.ppt

基因工程;考点1　基因工程的理论基础;考点2　基因工程的工具;（3）作用结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——;DNA连接酶;　　(2)与DNA聚合酶作用的比较;　　　　 （1）作用：①作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞内。 　　 ②利用载体在宿主细胞内对目的基因大量复制。 （2）具备的条件： 　　 （3）种类： 　　①最常用的载体是 　　特点： ②其他载体：;1、关于限制酶的说法中，正确的是（ ） A、限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列 B、EcoRI切割的是G—A之间的氢键 C．限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNA D．限制酶只存在于原核生物中;3、已知标记基因有抗四环素和抗氨苄青霉素,现探讨某质粒中有无标记基因或标记基因是什么?根据实验结果得出相应的结论。;考点3　基因工程的基本操作程序;原核细胞的基因结构;真核细胞的基因结构;（1）基因表达载体的组成： （2）构建方法;　　3.将目的基因导入受体细胞;　　　　 　①导入检测：;1. 采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。下列有关叙述正确的是（　　） A.人体细胞中凝血因子基因的碱基对数目，小于凝血因子氨基酸数目的3倍 B.可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵 C.在该转基因羊中，人凝血因子基因只存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中 D.人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA;2、农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下感染植物，因而在植物基因工程中得到了广泛的运用。如图为农杆菌转化法的示意图，试回答下列问题：; 　　（2）根据T-DNA的这一转移特点，推测该DNA片段上可能含有控制 （酶）合成的基因。 　　（3）图中c过程中，能促进农杆菌向植物细胞转移的物质是 类化合物。 　　（4）要获取能表现出新性状的植株，d过程涉及的生物学技术是 。 　　（5）植物基因工程中除了农杆菌转化法之外，还可采取 　 等。（至少写出两种）;　　3、用基因工程的方法，使大肠杆菌生产出鼠的β-珠蛋白。 　　（1）从小鼠中克隆出β-珠蛋白基因的编码序列（cDNA）。 　　（2）将cDNA连接上在大肠杆菌中可以适用的启动子，另外加上抗四环素基因，构建成一个表达载体。 　　（3）将表达载体导入无四环素抗性的大肠杆菌中，然后在含有四环素的培养基上培养大肠杆菌。如果表达载体未进入大肠杆菌中，大肠杆菌会因不含有抗四环素基因而死掉；如果培养基上长出大肠杆菌菌落，则表明β-珠蛋白基因已进入其中。 　　（4）培养进入了β-珠蛋白基因的大肠杆菌，收集菌体，破碎后从中提取β-珠蛋白。;;考点4　基因工程的应用;　　2.动物基因工程应用;　　3.基因治疗;　　4.乳腺生物反应器与微生物生产的比较;　　①如果工程菌为原核生物，因其没有内质网、高尔基体，所以不能生产糖蛋白类物质。 　　②基因治疗能从根本上治疗遗传病，不能治疗传染病，但由于尚未全面了解基因调控机制和疾病的分子机理，只处于初期的试验阶段。 　　③乳腺生物反应器受生物性别的限制，但从动物的尿液中提取的目的基因产物则不受性别限制。;　　考点5.蛋白质工程;　1、饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用蛋白质工程技术对其进行改造时，首先必须了解植酶的 ，然后改变植酸酶的 从而得到新的植酸酶。 　2、培育转植酸酶基因的大豆，可提高其作为饲料原料时磷的利用率。将植酸酶基因导入大豆细胞常用的方法是 。 3、为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过 转入猪的受精卵中。该受精卵培养至一定时期后可通过 方法，从而一次得到多个转基因猪个体。 4、若这些转基因动、植物进入生态环境中，对生态环境有何影响？