基因工程及其相关应用教学课件.ppt

基因工程的概念; 1.原理：基因重组 2.基因工程操作工具： （1）基因的剪刀—限制性内切酶 （2）基因的针线—DNA连接酶 （3）基因的运输工具—运载体 ;识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。; T;;;实例：EcoR Ⅰ限制酶能专一识别GAATTC序列，并在G和A之间将这段序列切开。 切割结果：产生两个带有黏性末端的DNA片段。 作用：基因工程中重要的切割工具。在微生物体内能将外来的DNA切断，对自己的DNA无损害。;二、 “分子缝合针” —— DNA连接酶;质粒 ;1、充当载体的条件： 能自我复制 ② 有一个至多个限制酶的切割位点 ③ 具有某些遗传标记基因 ④ 对受体细胞无害，易分离 ;补：原核细胞的基因结构;①不能转录为信使RNA，不能 编码蛋白质。;;真核细胞的 基因结构;; 3．DNA连接酶与DNA聚合酶的不同 ①DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羟基上；而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。 ②DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来，因此DNA连接酶不需要模板。 ;基因工程操作步骤： （1）提取目的基因 （2）目的基因与运载体结合 （3）将目的基因导入受体细胞 （4）目的基因的检测与鉴定;一、提取目的基因;二、目的基因与运载体结合——核心;目的基因;三、将目的基因导入受体细胞;四、目的基因的检测与鉴定;基因工程操作基本步骤;1、下列是几种搭配的密码子，据此推断图中合成的多肽，其前三个搭配的种类（按前后顺序排列） 。 ［甲硫氨酸（AUG）、甘氨酸（GGA）、丝氨酸（UCU）、酪氨酸（UAC）、精氨酸（AGA）、丙氨酸（GCU）］