生物制药学绪论与工程根本基础小结.pptVIP

;生物药物的特性;生物药物分类 1、基因工程药物 2、基因药物： 3、天然生物药物： 4、医学生物制品： 生物制药行业特征： 高技术 高投入 长周期 高风险 高收益 ; 基因工程技术是将所要重组对象的目的基因插入载体、拼接、转入新的宿主细胞，构建成工程菌(或细胞），实现遗传物质的重新组合，并使目的基因在工程菌(或细胞），内进行复制和表达的技术。 ;获得目的基因;基因重组的步骤： （1）获得目的基因； （2）构建DNA重组体； （3）将重组体导入宿主细胞； （4）目的基因的克隆与鉴定； （5）目的基因的扩增与目的蛋白的表达 （6）目的蛋白的纯化与制剂 ;发酵的一般流程; 培养基的主要成分： 1、碳源:是构成微生物细胞及代谢产物的碳架及所需的能量 来源，是发酵的主要原料之一。 2、氮源:构成生物细胞蛋白质（包括酶）和某些代谢产物的 主要成分。没有氮源微生物发酵就不能进行。 3、无机盐类:构成微生物细胞的重要成分,调节微生物的生 长代谢，影响和调节细胞膜的通透性和渗透压，作为酶或 辅酶的成分或激活剂等。 4、生长因子:使生物细胞维持正常生长代谢必需的系列微 量有机化合物; 5. 前体物质和促进剂: 前体物质：能直接被微生物细胞利用合成目的代谢产物。 促进剂：无论对酶反应或微生物发酵均有促进作用的物质。 ;空气净化除菌方法 ;生物反应器：是利用生物体所具有的生物功能，在体外或体内通过生化反应或生物自身的代谢获得目标产物的装置系统、细胞、组织器官等等。 （1）按反应器内有机体种类 （2）按结构特征 ;分批发酵中的菌体生长规律典型的生长周期  A停滞期（ 延迟期） B 对数生长期（指数生长期） C 减速期 D 稳定期（静止期） E 衰老期（衰亡期）;生物产品研发所经历的三个阶段： （1）实验室阶段 生物细胞（菌种）的筛选和培养基的研究（1-5L) （2）中试阶段 参考小试的结果，5-500L生物反应器发酵 （3）工厂化生产 利用生产设备进行生产试验直至商业化生产，获取经济和社会效益 ;分离纯化的基本过程;细胞破碎 （1）机械破碎法 高压均质机、高速???磨机、超声波破碎器 （2）化学处理法 ①碱处理细胞 ②脂溶性有机溶剂 ③表面活性剂 （3）物理法 ①干燥法 ②反复冻融法 低温冻，室温化，反复多次。 ③渗透压法 （4）生物法 ①酶解法 ②组织自溶法 ;产物的提取方法 （一）沉淀法 1.有机溶剂沉淀 2.等电点沉淀法 3.盐析沉淀 4.加热沉淀 （二）萃取分离 萃取方法：1：溶剂萃取：小分子物质的提取 2：双水相萃取：蛋白等大分子的提取 （三）、层析提取技术 A 离子交换层析 静电荷 B 疏水层析 疏水性 C 亲和层析 生物学作用、与巯基、金属螯合等 D 凝胶过滤层析 大小和形状 ; 离子交换层析是以离子交换剂为固定相，以特定的含离子溶液为流动相，利用离子交换剂对待分离的各种离子结合力的差异，而将混合物中不同离子进行分离的层析技术。 疏水层析是根据分子表面疏水性差别来分离蛋白质和多肽等生物大分子的一种较为常用的方法。 亲和层析是利用固定化配基与目的蛋白质之间特异的生物亲和力进行吸附，如抗体与抗原、受体与激素、酶与底物之间的作用。 凝胶过滤层析：是以具有大小一定的多孔性凝胶作为分离介质，小分子能进入孔内，在柱中缓慢移动，而大分子不能进入孔内，快速移动，利用这种移动差别可使大分子与小分子分开。 　;（四）膜分离 透析（Dialysis DS） 反渗透（Reverse osmosis RO） 超滤（Uitrfiltration UF） 微滤（Microfitration MF） 电渗析（Electrodialysis EI） ;离子交换介质的选择原则 酸性物质用阴离子交换剂分离 碱性物质用阳离子交换剂分离 氨基酸、核苷酸、蛋白质等两性电解质，可根据其pI值及离 子化曲线来选择;固定化酶：把游离酶经处理约束限制在一固定空间或载体上形成的酶。 酶固定方法: 1.包埋法：网格型（将酶包埋在高分子凝胶细微网格中成为网格型）；微囊型（将酶包埋在高分子半透膜中）。 2.吸附法：酶被吸附在不溶性载体的一种固定方法。 3.交联法：双功能或多功能试剂使酶与微生物或微生物与微生物细胞之间交联的固定化方法。 4.共价结合法：酶以共价键结合于载体的固定方法 ;1 概念： 生物技术、生物工程、基因工程、固定化酶、基因工程技术、 生物制药、灭菌、生物反应器 2、生物药物的特性、分类、行业的特征？ 3、培养基的主要成分、培养基灭菌意义和要求。 4、空气净化除菌方法、常用的过滤介质。 5、基因重组的步骤。 6.微生物发酵方法、菌体典型生长周期。 7.酶的