第十章节 - 人类基因表达-2.pptVIP

人类分子遗传学课件;Chapter 10 Human gene Expression;本章内容提示;一、mRNA前体的可变剪接; 在mRNA前体的剪接过程中，参加剪接的外显子可以不按其线性次序剪接，内含子也可以不被切除而保留，即一个外显子或内含子是否出现在成熟mRNA中是可以选择的。;2. 可变剪接的方式： （1）选用不同的启动子； （2）选用不同的加尾位点； （3）选用不同的剪接位点； （4）同时采用以上两种方式；;（1）利用不同的启动子;DMD基因的特异性表达;（3）选用不同的剪接位点;3. 可变剪接的调控机制;人类编码蛋白的基因约27000个，蛋白种类约90000。 40％～60％人类编码蛋白的基因发生可变剪接； 由于剪接的多样化，一个基因在转录后通过mRNA前体的剪接加工而产生两个或更多的蛋白质。; RNA编辑（editing）： 指遗传信息在mRNA水平上发生改变的过程。RNA的编码序列与转录产生它的DNA序列不同，转录后的RNA在编码区发生碱基的加入，丢失或转换等现象。 导致了DNA所编码的遗传信息的改变（如单碱基突变）。;APOB基因的组织特异性RNA编辑;编辑的机制;插入U 的两步转酯反应; 运输控制（transport control）是对初始转录产物从细胞核运送到细胞质中的数量进行调节。 合成的RNA大约有1/12能被运出核进入细胞质，50％左右的在核内降解，还有一些留在核。 ; 表观遗传变异（epigenetics variation） 基因结构的改变会导致表型的改变，这种变异是可以遗传的；在基因DNA序列不发生改变的情况下，基因表达可发生可遗传的变化，这种变化同样导致表型的改变。 前面讲过的RNA编辑，本节讲的DNA甲基化、基因组印迹都是表观遗传变异，此外还有X染色体失活等，这些变异的遗传不符合孟德尔的遗传规律。;一、DNA甲基化;;在真核生物中，5-甲基胞嘧啶主要出现在CpG序列、CpXpG、CCA/TGG和GATC中； CpG二核苷酸通常成串出现在DNA上，称为CpG岛。;1. CpG甲基化的过程;2. DNA甲基转移酶的类型;3. DNA甲基化的分布 染色体水平上，DNA甲基化在着丝粒附近水平最高；; 基因水平上，DNA甲基化高水平区域涵盖了多数转座子，假基因和小RNA编码区。;4. DNA甲基化抑制基因转录的机理; 染色体水平：; DNA甲基化抑制基因转录的直接机制： 某些转录因子的结合位点内含有CpG序列，甲基化以后直接影响了蛋白质因子的结合活性，不能起始基因转录。 甲基化抑制转录的间接机制： CpG甲基化，通过改变染色质的构象或者通过与甲基化CpG结合的蛋白因子间接影响转录因子与DNA的结合。;5. DNA甲基化的意义;近几年，哺乳动物克隆取得较大进展，体细胞克隆已在多种哺乳动物获得成功，但成功率仍很低，面临着许多问题：重构胚难以植入子宫、流产率高、胎盘过大、出生个体体重过重、许多个体有呼吸循环系统疾病等。 这些异常表型的高发性和穿越种间的相似性说明：这些问题主要不是由遗传信息的改变引起的而是由外遗传信息的改变导致的，其主要原因就是基因没有获得正确的重新编程。;配子发生和胚胎发育中的甲基化现象;印记基因的“印记”形成于配子发育晚期，并且独立于胚胎发育中的全局性去甲基化作用和甲基化作用； 在配子发生晚期，将建立印记基因亲本特异的甲基化标志，若此标志一旦丢失，除非经过生殖系(germ line)的传递，否则将不可能再次获得。 胚胎期，在精子进入卵子时发生的主动去甲基化中，一些父系表达的印迹基因将受保护不被去甲基化。;哺乳动物发育过程中DNA甲基化的改变;哺乳动物克隆过程中基因的重新编程有其显著的特殊性，最主要在于它没有经过配子发生这一阶段，重新编程必须在供核进入卵子和重构胚基因组开始转录这一短暂阶段发生。 重新编程后有3种结果：(1)没有得到重新编程，克隆胚胎立即死亡；(2)部分重新编程，将导致各种异常表型和(或)死于发育的各个阶段；(3)正确重新编程，产生正常克隆动物。;遗传印记（gene imprinting)是指基因组在传递遗传信息的过程中，通过基因组的化学修饰（DNA的甲基化；组蛋白的甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化等）而使基因或DNA片段被标识的过程。;特点：;“臃肿的年轻人”;普拉德－威利综合症（PWS）;“一个学习差的小个子肥胖儿童 ”;经过询问还得知，患儿出生后哭声微弱，无力吸食母亲的奶水，是靠人工辅助喂养长大的，生长发育较同龄儿童慢，但到两三岁后，胃口奇佳，食量大增过度肥胖，个子却较矮小。 对患儿进行了基本体格检查，发现有隐睾，阴茎明显短小，讲话不够清晰，当被问及 “1加1等于几”、 “2